serochem?PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑，設(shè)計(jì)用于穩(wěn)健、低成本和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)。PEI是HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)物瞬時(shí)轉(zhuǎn)染最常用的試劑。下面以PEI?Prime為例，來(lái)說(shuō)明serochem?PEI轉(zhuǎn)染試劑配制。

一、實(shí)驗(yàn)材料：

serochem PEI轉(zhuǎn)染試劑100 mg（Prime-P100-100MG）、100 mL細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水、10 mL 0.1 M USP級(jí)氫氧化NA、（0.1或0.2）μm注射器過(guò)濾器、刻度100毫升容器、無(wú)菌等分容器(聚丙烯或聚乙|烯)

二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備：

分析天平、pH計(jì)、生物安全柜或潔凈室外殼、過(guò)濾設(shè)備（如注射器、真空泵）

三、配制流程：

1. 準(zhǔn)確稱量100 mg PEI Prime，將粉末溶于80mL細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水中。攪拌幾分鐘來(lái)溶解粉末。

注意：混合后可能會(huì)殘留微量固體。如果存在，將在稍后的步驟中移除，這些不會(huì)影響性能。

2. 逐漸向PEI Prime中加入0.1 M氫氧化NA溶液，同時(shí)用pH計(jì)監(jiān)測(cè)，將pH調(diào)節(jié)至7.0 +/- 0.1，在加入氫氧化NA之后充分混合。注意：使用少于10ml的氫氧化NA溶液

3. 添加細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水，使PEI Prime溶液使總體積達(dá)到100ml。

4. 在無(wú)菌環(huán)境中，如清潔的生物安全機(jī)柜或潔凈室，對(duì)溶液進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾，用（0.1或0.2）μm注射器過(guò)濾器將溶液無(wú)菌過(guò)濾到無(wú)菌儲(chǔ)存容器中。

注意：建議使用PES過(guò)濾膜；尼龍膜也可行。

5. 在4°C的溫度下給容器貼上標(biāo)簽，可儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。

注意：不要冷凍，不要使用冷凍過(guò)一次以上的等分試樣。