EZElisa雌二醇ELISA試劑盒參數(shù)分析&樣品制備方案
雌二醇(E2)是一種類固醇激素,屬于雌激素,也是主要的女性性激素。它以及在調(diào)節(jié)發(fā)情和月經(jīng)女性生殖周期方面起著重要作用。雌二醇在青春期、成年期和妊娠期間對于女性生殖組織(如乳房、子宮和陰道)的發(fā)育和維持至關(guān)重要,但它也對許多其他組織產(chǎn)生重要影響,包括骨骼、脂肪、皮膚、肝臟和大腦。雖然男性的雌激素水平較女性低,但雌激素在男性中也有重要功能。它存在于大多數(shù)脊椎動物、甲殼動物、昆蟲、魚類和其他動物物種中。該試劑盒采用競爭性抑制酶免疫測定技術(shù)。所提供的微孔板已經(jīng)預(yù)包被了特異性抗雌二醇抗體。標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。競爭性抑制反應(yīng)在HRP標(biāo)記的雌二醇與未標(biāo)記的雌二醇與抗體之間展開。將底物溶液加入到孔中,顏色的發(fā)展與樣品中雌二醇的含量相反。停止顏色的發(fā)展并測量顏色的強度。 ? 艾美捷EZElisa雌二醇ELISA試劑盒基本參數(shù): 目錄號:D-AEK0003 規(guī)格:48T/96T 儲存:在4°C下儲存12個月,避光。 檢測范圍:40 pg/mL-1,000 pg/mL 靈敏度:40 pg/mL 精密度:內(nèi)部試驗精密度:變異系數(shù)(CV)<15%。間接試驗精密度:變異系數(shù)(CV)<15% 恢復(fù)率:恢復(fù)率范圍為85%至115%,總體平均恢復(fù)率為100% 特異性:EZElisa?雌二醇(E2)ELISA試劑盒對雌二醇的檢測具有高靈敏度和優(yōu)異的特異性。未觀察到雌二醇與類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾。 適用樣品:血清、血漿 ? 供應(yīng)材料和儲存條件:
Note: Std1: 0 pg/mL; Std2: 40 pg/mL; Std3: 100 pg/mL; Std4: 200 pg/mL; Std5: 400 pg/mL; Std6;1,000 pg/mL.
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EZElisa雌二醇ELISA試劑盒試劑準(zhǔn)備: 注意:使用前將所有試劑平衡至室溫。按照微孔板讀數(shù)儀的說明進行設(shè)置,并在測量光密度之前預(yù)熱15分鐘。
1×洗滌緩沖液:將洗滌緩沖液(20×)用去離子水稀釋1:20,得到1×洗滌緩沖液。儲存在4°C。如果洗滌緩沖液濃縮物中形成了結(jié)晶,請輕輕加熱至完全溶解。儲存在室溫下。請注意,1×洗滌緩沖液穩(wěn)定期為30天。
工作溶液:根據(jù)辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇的體積取相應(yīng)的檢測緩沖液1/10,并與辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇混合,得到工作溶液,使用前進行混合。例如:取3 mL辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇,加入0.3 mL檢測緩沖液,混合得到工作溶液。
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EZElisa雌二醇ELISA試劑盒樣品制備:
1.血清:使用血清分離管,在室溫下凝固樣品30分鐘后,以1,000 g的速度離心15分鐘。立即使用血清進行檢測,或?qū)悠贩盅b并儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
2.血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在采集后30分鐘內(nèi)以1,000 g的速度離心15分鐘。立即進行檢測,或?qū)悠贩盅b并儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
注意:不要使用明顯溶血或脂肪乳化的樣本。如果樣品將在24小時內(nèi)使用,可以儲存在2到8°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。在進行檢測前,應(yīng)將冷凍樣品緩慢恢復(fù)至室溫,并輕輕混勻。
? 程序分析:
1.?從微孔板架上取下多余的微孔板條,將它們放回包含干燥劑包的鋁箔袋中,并重新密封。 2.?每個孔中加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品。建議將所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣品都復(fù)制加入微孔板中。設(shè)置一個空白孔,不加入任何溶液。 3.?向每個孔中加入50 μL工作溶液(空白孔除外),充分混勻,用提供的孔蓋蓋好,然后在37°C下孵育1小時。 4.?倒掉每個孔中的液體并進行洗滌,總共洗滌三次。使用多通道移液器或自動微孔板洗滌器,將每個孔填滿1×洗滌緩沖液(250 μL),靜置10秒鐘,每個步驟中完全去除液體對良好的性能至關(guān)重要。在最后一次洗滌后,倒轉(zhuǎn)孔板并用干凈的紙巾輕輕拍干任何剩余的1×洗滌緩沖液。 5.?向每個孔中加入50 μL HRP底物A和50 μL HRP底物B,充分混勻,并用提供的孔蓋蓋好。在37°C下孵育15分鐘。將孔板放在黑暗中,遠離氣流和其他溫度波動。 6.?向每個孔中加入50 μL停止溶液。停止溶液應(yīng)按照HRP底物的加入順序加入到孔板中。孔中的顏色應(yīng)從藍色變?yōu)辄S色。如果孔中的顏色是綠色,或者顏色變化不均勻,請輕輕敲擊孔板以確保充分混合。 7.?在30分鐘內(nèi)使用設(shè)置為450 nm的微孔板讀數(shù)儀測定每個孔的光密度。 ? 該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。