腎移植是目前尿毒癥患者的首選治療手段。由于臨床試驗(yàn)的諸多限制性，因而建立合適的腎移植動(dòng)物模型對(duì)腎移植相關(guān)基礎(chǔ)及應(yīng)用研究具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

動(dòng)物的選擇

大鼠是目前進(jìn)行腎移植基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究的重要?jiǎng)游铩?/p>

造模方法

由于大鼠腎靜脈壁薄脆弱及輸尿管纖細(xì)迂曲的特點(diǎn)，在動(dòng)物模型構(gòu)建的過(guò)程中靜脈吻合和尿路重建往往成為重點(diǎn)、難點(diǎn)所在，時(shí)常制約和影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。通過(guò)不斷摸索及技術(shù)改進(jìn)，目前采用動(dòng)脈端端吻合、靜脈端端吻合和輸尿管端端吻合法建立一種穩(wěn)定、可靠的大鼠腎移植模型。

試驗(yàn)動(dòng)物

無(wú)特定病原體（SPF）級(jí)Wistar雄性大鼠，體重250～300g。供受鼠均為Wistar大鼠。

模型的建立方法

1

供腎切取

1%戊巴比妥鈉10ml/kg腹腔注射麻醉大鼠，備皮消毒，仰臥位取腹正中切口，沿腹中線從劍突下至恥骨聯(lián)合上剪開皮膚及肌肉進(jìn)入腹腔，勿傷及腸道。打開后腹膜，滴注2%的利多卡因約1ml于血管，保持血管濕潤(rùn)的同時(shí)還可以減輕血管游離過(guò)程中的痙攣現(xiàn)象。顯微鑷游離輸尿管，注意保留伴行血管，游離至腎下極2cm處斜行剪斷輸尿管。游離腎臟至近腎門處，保留少量腎周脂肪組織以便牽拉腎臟。自近端向遠(yuǎn)端游離腎動(dòng)脈及腎靜脈至近腎門，8-0顯微縫線結(jié)扎腎靜脈分支，如性腺血管、腎上腺動(dòng)靜脈。處理腎動(dòng)靜脈時(shí)，仔細(xì)操作，注意變異小分支的存在，并同樣分離結(jié)扎或電刀電灼止血。

腎動(dòng)脈、腎靜脈、下腔靜脈及腹主動(dòng)脈游離充分后，取1ml 肝素生理鹽水（100 U/ml）于陰莖背靜脈注射，全身肝素化受鼠。于左腎動(dòng)脈與右腎動(dòng)脈間腹主動(dòng)脈下方穿過(guò)6-0絲線一根，打好空的外科結(jié)、暫不收緊。腹主動(dòng)脈分叉處上方以同樣的方法置空結(jié)線一根，并以血管夾于此線下方阻斷腹主動(dòng)脈，收緊最上方的外科結(jié)，緊貼下腔靜脈剪斷左腎靜脈。于血管夾阻斷水平以上的腹主動(dòng)脈以28G留置針穿刺，收緊預(yù)置的6-0空結(jié)線，固定針頭。

緩慢勻速注入4℃肝素生理鹽水，可見腎靜脈端口流出血性液體，持續(xù)注入灌注液至靜脈端流出液為無(wú)色，腎臟顏色蒼白為止，總量約5ml。近腹主動(dòng)脈離斷腎動(dòng)脈，取下腎臟，放入已預(yù)置冰上的肝素生理鹽水中。

2

供腎移植

同供鼠操作，暴露受鼠游離腎臟，結(jié)扎腎上腺、性腺血管等分支，游離左腎動(dòng)脈、腎靜脈，于腎門下約1cm處結(jié)扎并斜行剪斷輸尿管。近腹主動(dòng)脈及下腔靜脈，以動(dòng)脈夾阻斷腎動(dòng)脈、腎靜脈，近腎門剪斷腎動(dòng)、靜脈，移除受體左腎。用肝素生理鹽水沖洗近端殘端，盡量沖出殘留血液，修剪斷面。用紗布自制帶洞腎袋，置入供腎，使腎動(dòng)脈、靜脈和輸尿管經(jīng)洞口暴露于腎袋外，腎袋表面撒少量冰水，以保持腎臟低溫。

首先吻合位于背面的腎動(dòng)脈，采用11-0帶針縫線兩定點(diǎn)法行間斷吻合。首先于腎動(dòng)脈上方和下方縫合兩針，分別用血管夾固定作牽引。先縫合前壁，在前壁正中縫合一針，暫不打結(jié)。在中點(diǎn)針與上、下定點(diǎn)的中點(diǎn)處各縫合一針，均暫不打結(jié)，待3針均結(jié)束以后依次打結(jié)。翻轉(zhuǎn)固定線，使后壁朝前，同法縫合后壁，完成后剪斷固定線，動(dòng)脈共計(jì)吻合8針（含兩定點(diǎn)）。

腎靜脈也采用兩定點(diǎn)法，11-0帶針縫線連續(xù)縫合。先縫合后壁，縫完后壁后與相連固定線打結(jié)，無(wú)需翻轉(zhuǎn)固定線，繼續(xù)縫合前壁。前后壁各縫合7針左右，縫合完成后剪斷固定線。

經(jīng)陰莖背靜脈注入含80kU青霉素鈉的溫生理鹽水約3ml補(bǔ)充血容量，使用血管夾分別阻斷吻合口遠(yuǎn)端的腎動(dòng)脈及腎靜脈，開放吻合口近端血管夾，觀察血管通暢與否，是否有明顯滲漏。一般而言，開放血管后初期可見吻合口少量滲血，采用棉簽輕輕壓迫1分鐘后即可止血。如出血明顯難以止住，則可謹(jǐn)慎進(jìn)行補(bǔ)縫。血管吻合通暢后剪開腎袋，開放腎門處血管夾，觀察腎臟灌注后顏色與質(zhì)地，輸尿管口有無(wú)尿液流出。如吻合口通暢，30秒內(nèi)可見腎臟迅速變紅，質(zhì)地變硬，動(dòng)脈搏動(dòng)良好，靜脈充盈。

繼續(xù)觀察輸尿管口5分鐘左右，見尿液流出后行輸尿管端端吻合。采用11-0帶針縫合線，斜行貼合兩輸尿管殘端，分別于4點(diǎn)間斷縫合輸尿管。

最后切除右側(cè)腎臟，檢查腹腔有無(wú)活動(dòng)性出血，溫生理鹽水沖洗腹腔，以利于受鼠復(fù)溫。使用3-0帶針縫合線縫合肌肉、皮膚，手術(shù)結(jié)束。

結(jié)果

一般認(rèn)為，大鼠失去雙側(cè)腎臟24小時(shí)內(nèi)將死亡，因此，選擇術(shù)后3天為界限，判斷腎移植是否成功。