今天瑞禧生物小編給大家整理分享了負(fù)載銅離子殼聚糖水凝膠微球/胰島素樣生長因子-1的C結(jié)構(gòu)域多肽修飾殼聚糖水凝膠的研究制備，一起來學(xué)習(xí)！

胰島素樣生長因子-1(IGF-1)的C結(jié)構(gòu)域多肽修飾殼聚糖(CS)制備生物活性 CS-IGF-1C水凝膠,評價水凝膠的細(xì)胞相容性及其對脂肪來源干細(xì)胞(ADSCs)生物學(xué)特性的影響.利用水凝膠負(fù)載ADSCs,評價CS-IGF-1C能否改善ADSCs在體內(nèi)存活并提高其多向分化能力,探討其增強(qiáng)細(xì)胞效果的機(jī)制,為使用組織工程學(xué)手段促進(jìn)腎臟修復(fù)提供新的理論依據(jù).

制備方法:1.從表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)-螢火蟲熒光素酶(Fluc)雙融合蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠脂肪分離ADSCs進(jìn)行體外培養(yǎng),評價細(xì)胞增殖能力,使用熒光顯微鏡,流式細(xì)胞學(xué)(FCM)及生物發(fā)光成像(BLI)證實(shí)細(xì)胞轉(zhuǎn)基因特性,鑒定細(xì)胞表型并描述其多向分化潛能.2.合成IGF-1的C結(jié)構(gòu)域(IGF-1C)多肽,并使用多肽修飾CS獲得CS-IGF-1C,使用傅里葉紅外光譜(FT-IR)分析CS-IGF-1C的化學(xué)結(jié)構(gòu),平行板流變儀檢測水凝膠的流變學(xué)特性,掃描電鏡(SEM)觀察CS-IGF-1材料的形態(tài),并評價CS-IGF-1C的成膠性能.在涂布水凝膠的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)ADSCs,觀察細(xì)胞形態(tài)并使用活死染色評價水凝膠的細(xì)胞相容性.3.將ADSCs培養(yǎng)于涂布水凝膠的培養(yǎng)皿中,使用CCK-8法和BLI評價細(xì)胞增殖能力,實(shí)時定量RT-PCR技術(shù)檢測細(xì)胞中增殖相關(guān)基因(HGF,IGF-1和EGF)的表達(dá).

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