問(wèn)題1：柱子的型號(hào)有哪些，分別的填充物是什么，有什么不同，在不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)怎樣選擇柱子？
問(wèn)題2：關(guān)于流速的問(wèn)題，一般樣品檢測(cè)需要多少流速，同樣的，不同實(shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)怎樣選擇流速？
問(wèn)題3：實(shí)驗(yàn)時(shí)經(jīng)常會(huì)由于一些樣品問(wèn)題和液相溶液?jiǎn)栴}導(dǎo)致的壓力過(guò)大，這個(gè)的具體原因可以總結(jié)一下嗎？

1.關(guān)于普通C18和色譜柱種類的一些知識(shí)，我另外一個(gè)視頻有講。

不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)怎樣選擇柱子？

這個(gè)問(wèn)題非常復(fù)雜，我們實(shí)際在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候不會(huì)這么去想這些。我把實(shí)際可能出現(xiàn)的問(wèn)題分成兩種情況：

第一，有參考的文獻(xiàn)。

我們首先是去找待測(cè)物的相關(guān)文獻(xiàn)，或者標(biāo)準(zhǔn)。

參考別人是用什么做的！然后在這個(gè)基礎(chǔ)上去優(yōu)化。如果是峰不好，或者分離效果不好。最好選普通的，常用的。選參數(shù)：粒徑，柱長(zhǎng)。

第二，完全沒(méi)人用液相做過(guò)這東西。

第二種就比較麻煩。

首先，就是確定這物質(zhì)能不能用現(xiàn)有的檢測(cè)器測(cè)定。如紫外檢測(cè)器或者二極管檢測(cè)器，待測(cè)物必須紫外吸收。如果是熒光檢測(cè)器，必須有熒光吸收。假如都沒(méi)有，那就另說(shuō)了。

假如說(shuō)是檢測(cè)器能做的，我們就先用普通C18去跑，用不同的流動(dòng)相去試（這個(gè)過(guò)程非常復(fù)雜）。C18的粒徑也很多。分離能力也不一樣，如果說(shuō)是分離多個(gè)物質(zhì)，而不是一個(gè)待測(cè)物，那么情況也會(huì)不同。如果說(shuō)沒(méi)保留，那就去查待測(cè)物的一個(gè)性質(zhì)。看能用其他類型的柱子是否有效。

?

2.流速，是看情況的。大部分流速都是1.0ml/min左右。流速要根據(jù)出峰情況和色譜柱來(lái)選擇。

?

3.因?yàn)闃悠穯?wèn)題導(dǎo)致的壓力上升只有一個(gè)，那就是樣品中的雜質(zhì)在色譜柱中積累，堵住了色譜柱。一般都是前處理的問(wèn)題。

流動(dòng)相導(dǎo)致的壓力過(guò)大，第一個(gè)是比例問(wèn)題。不同的溶劑混合后，溶液的黏度是不一樣的，黏度大了之后，壓力就會(huì)上升了。溫度也會(huì)影響溶液的黏度。第二個(gè)是流速設(shè)置過(guò)大了。色譜柱如果是粒徑比較小的，流速設(shè)置不能太大的。第三個(gè)是如果流動(dòng)相有使用到緩沖鹽，沒(méi)有正確使用，導(dǎo)致緩沖鹽結(jié)晶析出，堵住管路，壓力也會(huì)變大。