缺碘性甲狀腺腫動物模型【北京動物實驗】

【造模機制】缺碘飼料中含碘很低,不能滿足機體的需要,因而影響甲狀腺激素的合成,導(dǎo)致 TSH 分泌增加,從而引起甲狀腺代償性增生肥大。

【造模方法】

1.動物和低碘飼料 選用 4 周齡 Wistar 大鼠,體重 90~110g,雌雄各半。飼料采用購自嚴重地方性甲狀腺腫病區(qū)的糧食配制的低碘飼料,含碘量為 60μg/kg,非缺碘組飲用碘濃度為200μg/kg 的碘酸鉀溶液,碘攝人量相當于大鼠生理碘需要量。磨粉后 120℃烘烤 24 小時。將玉米,谷子,黃豆分別按 73％,20％、7%的質(zhì)量比混和,根據(jù)大鼠標準飼料配方的營養(yǎng)要求添加適量的維生素、無機鹽等飼料添加劑。氯化鈉采用分析純品,經(jīng) 750℃烘烤 12小時后使用。

2.模型制備 自由飲用電阻值 2000kQ 以上的去離子水,用上述低碘飼料喂養(yǎng) 3 個月后處死。大鼠處死前于代謝籠中收集 24 小時尿,測尿碘。稱體重,然后以 10%水合氯醛腹腔麻醉大鼠,分離甲狀腺組織,稱重后迅速切成 1mm組織數(shù)塊,浸人含有 25％戊二醛的二甲砷酸鈉緩沖液固定,常規(guī)方法制作電鏡標本。其余組織迅速置于防凍管并浸入液氮中,然碘甲腺原氨酸(T)、四碘甲腺原氨酸(Ts)的含量。后于-70℃冰箱凍存,用于制作冷凍切片及測定甲狀腺內(nèi)過氧化物酶活性及甲狀腺內(nèi)鎮(zhèn),主定其放射性,計算吸碘率。(FT,)、游離 T,(FT).TSH。大概腹腔注射 Na''1,6 小時后處死取甲狀腺,用γ計數(shù)儀制3.觀察指標制備血清,放射免疫分析法測定血清總 T,(TT,),總 T(TT),游離下,

【模型特點】

1.給予 4 周齡 Wistar 大鼠低碘飼料和去離子水喂養(yǎng) 3 個月、尿碘中位數(shù)、甲狀腺組織碘和激素含量及血清總甲狀腺素水平顯著降低,甲狀腺相對重量、吸碘率、蛋白水解酶活性和血清甲狀腺刺激激素水平顯著增加。甲狀腺在光鏡下呈增生性甲狀腺腫的表現(xiàn)。缺碘大鼠甲狀腺明顯腫大、充血,甲狀腺相對重量明顯增大,尿碘含量顯著降低,甲狀腺組織勾漿碘、T 和 T,含量顯著降低。

2.缺碘大鼠模型與非缺碘大鼠相比,甲狀腺吸碘率顯著升高,甲狀腺過氧化物酶比活性有升高趨勢,血清 FT 呈下降趨勢,TT,顯著下降,FT,和 TTs呈升高趨勢,TSH 顯著升高。

3.光鏡下缺碘大鼠甲狀腺病理表現(xiàn)為增生性甲狀腺腫,濾泡變小,變形,上皮細胞增生肥大,呈高柱狀復(fù)層排列,有時形成乳頭狀向濾泡腔內(nèi)突起,濾泡和濾泡之間界限不清,濾泡腔內(nèi)膠質(zhì)稀薄。電鏡下可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴張;線粒體腫大,嵴明顯。隨缺碘時間延長,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高度擴張,呈囊泡狀,基質(zhì)減少,甚至出現(xiàn)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體解聚、脫顆粒,線粒體被擴張的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所包繞,有的線粒體出現(xiàn)腫脹,嵴變形,模糊,有的嵴消失呈空泡化,且基質(zhì)減少。

【應(yīng)用范圍】本模型模擬缺碘地區(qū)普通人群的甲狀腺狀態(tài),為地方性甲狀腺腫的研究提供了可靠的動物模型。對于致甲狀腺腫物質(zhì)以及由于某些酶的缺陷引起的甲狀腺激素合成障礙導(dǎo)致的甲狀腺腫,與本模型有共同的發(fā)病機制,因此本模型也適用于上述疾病發(fā)病過程及治療方法的研究,但涉及病因的研究則不適用。

【注意事項】配制飼料的糧食中碘含量必須保證足夠低,最好采自地方性甲狀腺腫病區(qū);飲水應(yīng)為去離子水;同時,飼養(yǎng)環(huán)境中空氣的含碘量可成為本模型成功與否的影響因素,因此,本模型的復(fù)制應(yīng)在設(shè)有空氣濾過裝置的屏障環(huán)境中進行。

【模型評估】本模型的復(fù)制方法簡便易行,可以人為地嚴格控制實驗條件?？赏瑫r成功地復(fù)制成缺碘性甲狀腺腫及甲狀腺功能減退模型。適用于人類地方性甲狀腺腫的各項研究。由于大鼠對缺碘的敏感性比小鼠高,而 Wistar 大鼠對蛋白質(zhì),維生素的要求不高,無自身免疫傾向,接受低碘(15~18jμg/kg)1 個月即出現(xiàn)甲狀腺增大,因此是用來復(fù)制缺碘動物模型較合適的品種。

文章轉(zhuǎn)載于北京吉田生物科技有限公司?可承接動物實驗