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本期關(guān)鍵詞：環(huán)狀RNA合成系統(tǒng)、外泌體環(huán)狀RNA、鐵死亡、circARFGEF2、circAFF2、circ-FBXW7、wnt信號(hào)、circFBXW7-185AA、circFBXW7、肺癌、結(jié)直腸癌（CRC）、胰腺導(dǎo)管腺癌、肺腺癌（LUAD)。

1、circ-FBXW7通過(guò)m6A依賴的Wnt信號(hào)的翻譯抑制增強(qiáng)TKI在肺腺癌中的敏感性

標(biāo)題：Enhancement of TKI sensitivity in lung adenocarcinoma through m6A-dependent translational repression of Wnt signaling by circ-FBXW7

期刊：Mol Cancer

IF：37.3

通訊作者：孫欣（西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

發(fā)表日期：2023.7.1

DOI：10.1186/s12943-023-01811-0

背景與目的：靶向表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突變的酪氨酸激酶抑制劑(Tyrosine kinase inhibitors, TKIs)顯著減輕了肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)患者的痛苦。第三代EGFR-TKI奧希替尼(Osimertinib)已成功用于臨床治療，克服了對(duì)原發(fā)性和獲得性T790M和L858R突變點(diǎn)的耐藥。然而，治療失敗反應(yīng)的問(wèn)題已成為一個(gè)不可克服的問(wèn)題。

方法:通過(guò)多種綜合方法的結(jié)合，作者成功地在腫瘤組中確定了一個(gè)在癌變、耐藥和復(fù)發(fā)中發(fā)揮重要作用的獨(dú)特群體。研究提示，解決TKI耐藥可能涉及靶向干細(xì)胞樣細(xì)胞的更新和再生。為了研究潛在的機(jī)制，作者進(jìn)行了RNA微陣列和m6A表觀轉(zhuǎn)錄組微陣列分析，然后評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子。此外，還專門設(shè)計(jì)了一個(gè)標(biāo)簽來(lái)檢測(cè)多肽circRNA-AA，并通過(guò)m6A調(diào)控來(lái)確認(rèn)其表達(dá)。

結(jié)果:作者在腫瘤干細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了獨(dú)特的分子標(biāo)簽，這些分子標(biāo)簽導(dǎo)致了治療效果不佳。替代Wnt通路的激活可以維持這些細(xì)胞的更新和抵抗?fàn)顟B(tài)。通過(guò)生物信息學(xué)分析和陣列研究，觀察到circFBXW7在奧希替尼耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)顯著降低。值得注意的是，circFBXW7的異常表達(dá)模式?jīng)Q定了奧希替尼的細(xì)胞應(yīng)答。功能研究表明，circFBXW7抑制腫瘤干細(xì)胞的更新，并使耐藥的LUAD細(xì)胞和干細(xì)胞對(duì)奧希替尼重新敏感。在潛在的機(jī)制方面，作者發(fā)現(xiàn)circFBXW7可以翻譯成短多肽，稱為circFBXW7-185AA。這些多肽以m6A依賴方式與β-catenin相互作用。這種相互作用通過(guò)誘導(dǎo)后續(xù)泛素化導(dǎo)致β-catenin穩(wěn)定性降低，從而抑制經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的激活。此外，作者預(yù)測(cè)m6A閱讀器YTHDF3與hsa-Let-7d-5p具有共同的結(jié)合位點(diǎn)。增強(qiáng)Let-7d在轉(zhuǎn)錄后水平的表達(dá)可降低YTHDF3的水平。Wnt信號(hào)對(duì)Let-7d的抑制釋放YTHDF3對(duì)m6A修飾的刺激，促進(jìn)circFBXW7-185AA的翻譯。這就形成了一個(gè)積極的反饋循環(huán)，促進(jìn)了癌癥的發(fā)生和發(fā)展。

結(jié)論:作者的實(shí)驗(yàn)室研究、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床驗(yàn)證表明，circFBXW7通過(guò)作用于β-catenin泛素化和抑制來(lái)調(diào)節(jié)Wnt通路功能，從而有效抑制LUAD干細(xì)胞的能力和逆轉(zhuǎn)TKIs的耐藥性。circRNA在奧希替尼治療中的調(diào)控作用鮮有報(bào)道，作者的研究結(jié)果揭示了這一過(guò)程是在m6A修飾的影響下運(yùn)作的。這些結(jié)果凸顯了該方法在增強(qiáng)治療策略和克服多種TKI治療耐藥方面的巨大潛力。

2、外泌體環(huán)狀RNA:對(duì)癌癥進(jìn)展和臨床應(yīng)用潛力的新見(jiàn)解(綜述)

標(biāo)題：Exosomal circRNA: emerging insights into cancer progression and clinical application potential

期刊：J Hematol Oncol

IF：28.5

通訊作者：嚴(yán)永敏（江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院&江蘇大學(xué)附屬奧陽(yáng)醫(yī)院）、許文榮（江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院&江蘇大學(xué)附屬奧陽(yáng)醫(yī)院）

發(fā)表日期：2023.6.26

DOI：10.1186/s13045-023-01452-2

摘要：

外泌體circRNA作為一種新的遺傳信息分子，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞和微環(huán)境細(xì)胞(如免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和其他成分)之間的交流，從而調(diào)節(jié)癌癥進(jìn)展的關(guān)鍵方面，包括免疫逃逸、腫瘤血管生成、代謝、耐藥、增殖和轉(zhuǎn)移。有趣的是，微環(huán)境細(xì)胞在外泌體circRNA釋放介導(dǎo)的影響腫瘤進(jìn)展和免疫逃逸方面有了新的發(fā)現(xiàn)。鑒于外泌體circrna的內(nèi)在穩(wěn)定性、豐度和廣泛分布，它們是液體活檢的優(yōu)秀診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物。此外，人工合成的circRNA可能為癌癥治療開(kāi)辟新的可能性，可能支持納米顆粒或植物外泌體遞送策略。本文綜述了腫瘤細(xì)胞和非腫瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體circRNA在腫瘤進(jìn)展中的功能和潛在機(jī)制，特別關(guān)注其在腫瘤免疫和代謝中的作用。最后，作者研究了外泌體circRNA作為診斷生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)的潛在應(yīng)用，強(qiáng)調(diào)了其在臨床應(yīng)用的前景。

3、一種基于起源于嗜熱四膜蟲(chóng)的核酶的精確和高效環(huán)狀RNA合成系統(tǒng)

標(biāo)題：A precise and efficient circular RNA synthesis system based on a ribozyme derived from Tetrahymena thermophila

期刊：Nucleic Acids Res

IF：14.9

通訊作者：鄒麗輝、肖飛、于雪（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院老年醫(yī)學(xué)研究所）

發(fā)表日期：2023.6.28

DOI：10.1093/nar/gkad554

摘要：

環(huán)狀RNA(circRNA)的經(jīng)典制備策略通常是在環(huán)狀產(chǎn)物中引入大量的線性轉(zhuǎn)錄本或額外的核苷酸。在本研究中，作者旨在開(kāi)發(fā)一種基于優(yōu)化的嗜熱四膜蟲(chóng)來(lái)源的內(nèi)含子Ⅰ型的自剪接核酶的circRNA高效制備系統(tǒng)。將目標(biāo)RNA序列插入核酶的下游，并在核酶上游添加一個(gè)互補(bǔ)的反義區(qū)域以輔助環(huán)化。

然后，作者通過(guò)DNMT1,CDR1as,FOXO3和HIPK3基因，比較了核酶或側(cè)翼內(nèi)含子互補(bǔ)序列(ICS)介導(dǎo)的循環(huán)效率，發(fā)現(xiàn)作者的系統(tǒng)的環(huán)化效率顯著高于側(cè)翼ICS介導(dǎo)的方法。因此，由核酶介導(dǎo)的環(huán)狀產(chǎn)物不會(huì)引入額外的核苷酸。同時(shí)，過(guò)表達(dá)的circFOXO3維持了其調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的生物學(xué)功能。最后，利用柯薩奇B3病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(internal ribosome entry site,IRES)序列，構(gòu)建了基于核酶的環(huán)狀mRNA表達(dá)系統(tǒng)，并成功翻譯了環(huán)狀mRNA。因此，該新型、方便、快速的工程RNA環(huán)狀體系可用于未來(lái)環(huán)狀RNA的功能研究和大規(guī)模制備。

4、突變型KRAS介導(dǎo)circARFGEF2的生物發(fā)生促進(jìn)胰腺導(dǎo)管腺癌的淋巴轉(zhuǎn)移

標(biāo)題：Mutant KRAS mediates circARFGEF2 biogenesis to promote lymphatic metastasis of pancreatic ductal adenocarcinoma

期刊：Cancer Res

IF：11.2

通訊作者：陳汝福（廣東省人民醫(yī)院）

發(fā)表日期：2023.6.26

DOI：10.1158/0008-5472.CAN-22-3997

摘要：

環(huán)狀RNA(circRNAs)參與癌癥的發(fā)生、增殖和轉(zhuǎn)移。circRNAs的生物發(fā)生可能受到腫瘤遺傳格局的影響。在此，作者鑒定了一個(gè)新的circRNA,circARFGEF2(hsa_circ_0060665)，它在KRASG12D胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)中表達(dá)上調(diào)，并且與KRASG12D PDAC的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。在體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，circARFGEF2過(guò)表達(dá)顯著促進(jìn)KRASG12D PDAC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在機(jī)制上，KRASG12D PDAC中的circARFGEF2的生物發(fā)生被選擇性剪接因子QKI-5顯著激活，QKI-5募集U2AF35以促進(jìn)剪接體組裝。QKI-5與ARFGEF2前體mRNA的內(nèi)含子3和6中的QKI結(jié)合基序和鄰近的反向補(bǔ)體序列結(jié)合，從而促進(jìn)circARFGEF2的生物發(fā)生。circARFGEF2吸附miR-1205，促進(jìn)JAK2活化，JAK2磷酸化STAT3，觸發(fā)KRASG12D PDAC淋巴管生成和LN轉(zhuǎn)移。重要的是，在KrasG12D/+Trp53R172H/+Pdx-1-Cre(KPC)小鼠PDAC模型中，circARFGEF2沉默顯著抑制LN轉(zhuǎn)移。這些發(fā)現(xiàn)為突變KRAS介導(dǎo)的circRNA生物發(fā)生的機(jī)制和促進(jìn)轉(zhuǎn)移的功能提供了見(jiàn)解。

5、環(huán)狀RNA FEACR通過(guò)與NAMPT相互作用抑制鐵死亡，減輕心肌缺血/再灌注損傷

標(biāo)題：Circular RNA FEACR inhibits ferroptosis and alleviates myocardial ischemia/reperfusion injury by interacting with NAMPT

期刊：J Biomed Sci

IF：11.0

通訊作者：王胤（青島大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院）、張宇輝（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院）、王昆（青島大學(xué)附屬山東省婦幼保健醫(yī)院&青島大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院）

發(fā)表日期：2023.6.27

DOI：10.1186/s12929-023-00927-1

背景與目的：研究表明環(huán)狀RNA(circular RNAs,circRNAs)在心肌缺血再灌注(myocardial ischemia and reperfusion,I/R)后心肌細(xì)胞死亡中發(fā)揮重要作用。鐵死亡是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種新的細(xì)胞死亡形式，已被證明參與了心肌I/R的調(diào)控。本研究利用circRNA測(cè)序探索I/R后調(diào)控心臟鐵死亡的關(guān)鍵circRNA，并研究潛在circRNA的功能機(jī)制。

方法:通過(guò)circRNA測(cè)序探索心肌I/R后差異表達(dá)的circRNA。采用定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)circRNA在不同組織中的表達(dá)，并檢測(cè)circRNA在心肌細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位。通過(guò)功能獲得和功能缺失實(shí)驗(yàn)探討circRNA在心肌I/R后心肌細(xì)胞鐵死亡和心肌組織損傷中的作用。應(yīng)用RNA pull-down探索與circRNA相互作用的蛋白質(zhì)。

結(jié)果:作者鑒定了一個(gè)鐵死亡相關(guān)circRNA (FEACR)，它在心肌細(xì)胞鐵死亡中具有潛在的調(diào)控作用。FEACR過(guò)表達(dá)可抑制I/r誘導(dǎo)的心肌梗死，改善心功能。FEACR抑制可誘導(dǎo)心肌細(xì)胞發(fā)生鐵死亡，F(xiàn)EACR過(guò)表達(dá)可抑制缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的鐵死亡。機(jī)制上，F(xiàn)EACR直接與煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(NAMPT)結(jié)合，增強(qiáng)NAMPT的蛋白穩(wěn)定性，從而增加NAMPT依賴的Sirtuin1 (Sirt1)表達(dá)，通過(guò)降低FOXO1乙?；?，促進(jìn)FOXO1的轉(zhuǎn)錄活性。FOXO1進(jìn)一步上調(diào)鐵死亡抑制因子FTH1的轉(zhuǎn)錄，從而抑制心肌細(xì)胞鐵死亡。

結(jié)論:circRNA FEACR介導(dǎo)的NAMPT-Sirt1-FOXO1-FTH1信號(hào)軸參與調(diào)控心肌細(xì)胞鐵死亡，保護(hù)心臟功能免受I/R損傷。因此，FEACR及其下游因子可能成為減輕缺血性心臟病鐵死亡相關(guān)心肌損傷的新靶點(diǎn)。

6、ALKBH5/ ythdf2介導(dǎo)的circAFF2 m6A修飾通過(guò)抑制Cullin neddylation增強(qiáng)結(jié)直腸癌的放射敏感性

標(biāo)題：ALKBH5/YTHDF2-mediated m6A modification of circAFF2 enhances radiosensitivity of colorectal cancer by inhibiting Cullin neddylation

期刊：Clin Transl Med

IF：10.6

通訊作者：蔣敬庭、顧文棟、鄭曉（蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院）

發(fā)表日期：2023.7.1

DOI：10.1002/ctm2.1318

背景:環(huán)狀RNA(circRNA)和N6-甲基腺苷(m6A)在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，包括結(jié)直腸癌(CRC)。然而，對(duì)于circRNA和m6A在CRC放射敏感性中的相互作用知之甚少。在這里，作者研究了一種新的m6A調(diào)節(jié)的circRNA在CRC中的作用。

方法:篩選來(lái)自放射敏感和放射耐藥結(jié)直腸癌組織中差異表達(dá)的環(huán)狀RNA。通過(guò)甲基化RNA免疫沉淀法檢測(cè)所選環(huán)狀RNA的修飾。最后，對(duì)選定的環(huán)狀RNA進(jìn)行放射敏感性試驗(yàn)。

結(jié)果:作者發(fā)現(xiàn)circAFF2與CRC的放射敏感性和m6A密切相關(guān)。circAFF2在放射敏感直腸癌患者中高表達(dá)，且circAFF2高表達(dá)的患者預(yù)后較好。此外，circAFF2在體外和體內(nèi)均能增強(qiáng)CRC細(xì)胞的放射敏感性。circAFF2的調(diào)控涉及alkbh5介導(dǎo)的去甲基化，隨后通過(guò)YTHDF2進(jìn)行識(shí)別和降解。救援實(shí)驗(yàn)顯示circAFF2可以逆轉(zhuǎn)ALKBH5或YTHDF2誘導(dǎo)的放射敏感性。在機(jī)制上，circAFF2與CAND1結(jié)合，促進(jìn)CAND1與Cullin1結(jié)合并抑制其類化修飾，從而影響CRC的放射敏感性。

結(jié)論:作者鑒定并表征了circAFF2是一種新的m6A修飾的circRNA，并驗(yàn)證了ALKBH5/YTHDF2/circAFF2/Cullin-NEDD8軸是CRC的潛在放療靶點(diǎn)。