關(guān)于染料木素(GNS)牛血清白蛋白偶聯(lián)物,熒光光譜法分析

今天小編整理并分享關(guān)于熒光光譜法分析染料木素(GNS)牛血清白蛋白偶聯(lián)物：

熒光光譜法（Fluorescence Spectroscopy）是一種用于研究分子和物質(zhì)的熒光性質(zhì)的分析技術(shù)。它基于分子吸收紫外光后再輻射出較長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光光子的現(xiàn)象，用于研究物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、構(gòu)象、濃度、相互作用等信息。熒光光譜法在化學(xué)、生物學(xué)、藥物研發(fā)、環(huán)境科學(xué)和材料科學(xué)等領(lǐng)域都有的應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)方法：

準(zhǔn)確移取一定量的染料木素乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL具塞比色管中，待乙醇揮發(fā)完全后，再加入BSA標(biāo)準(zhǔn)溶液5.0 mL，超聲分散5 min后，實(shí)驗(yàn)溫度下恒溫2 h。在激發(fā)和發(fā)射光柵狹縫均為5 nm,激發(fā)波長(zhǎng)為283 nm下，掃描--定波長(zhǎng)范圍內(nèi)BSA和 BSA-染料木素的熒光猝滅光譜、同步熒光光譜。以pH 7.4 Tris-HCl緩沖溶液為溶劑，配制1.0×10~5molL的染料木素溶液，實(shí)驗(yàn)溫度下恒溫測(cè)定其300 ~ 500 nm的UⅣ吸收光譜。

結(jié)論：采用熒光和紫外.可見吸收光譜,研究了染料木素與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.結(jié)果表明染料木素對(duì)BSA有較強(qiáng)的熒光猝滅作用;根據(jù)Sterm Volmer方程得到染料木素與BSA之間的結(jié)合常數(shù)KA為4.37×10^6(27℃),6.45×10^6(37℃)和6.76×10^6(47℃).

根據(jù)Forster非輻射能量轉(zhuǎn)移理論,求出了染料木素與BSA之間的結(jié)合距離為2.64nm(27℃),2.68nm(37℃)和2.71nm(47℃).熱力學(xué)數(shù)據(jù)表明該藥物與牛血清白蛋白的相互作用是一個(gè)吉布斯自由能降低的自發(fā)過程,且二者之間的主要作用力類型為靜電引力。

Dylight 405 conjugated Streptavidin

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