星戈瑞Sulfo-CY5 maleimide巰基反應(yīng)性及與生物分子的共價結(jié)合
Sulfo-CY5 maleimide是一種巰基反應(yīng)性熒光染料,它具有與含有游離巰基官能團的生物分子特異性共價結(jié)合的能力。巰基反應(yīng)是一種常用的生物分子標記方法,特別適用于標記含有巰基官能團的蛋白質(zhì)、肽段和其他生物分子。
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巰基反應(yīng)的機理如下:
1. Sulfo-CY5 maleimide中的馬來酰亞胺官能團具有親電性,可以與親核性的巰基(-SH)反應(yīng)形成硫醇酯鍵。在此反應(yīng)中,Sulfo-CY5 maleimide的N-乙酰亞胺和N-羥乙基異封基團在酰胺環(huán)打開后,與巰基結(jié)合。
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2. 在蛋白質(zhì)或細胞內(nèi),含有游離巰基的生物分子與Sulfo-CY5 maleimide發(fā)生巰基反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價結(jié)合。這種共價結(jié)合是不可逆的,因此標記的熒光染料不容易從目標生物分子中釋放出來。
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3. 巰基反應(yīng)具有高度的特異性,因為只有含有游離巰基的生物分子才能與Sulfo-CY5 maleimide反應(yīng),而其他生物分子不會發(fā)生共價結(jié)合。
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使用Sulfo-CY5 maleimide進行巰基反應(yīng)的步驟通常如下:
1. 準備含有巰基官能團的生物分子或細胞樣本。
2. 將Sulfo-CY5 maleimide與生物樣品混合,并在適當?shù)臈l件下反應(yīng)一段時間,使其發(fā)生巰基反應(yīng)。
3. 去除未反應(yīng)的熒光染料和其他雜質(zhì),如通過凝膠過濾、洗滌等方法。
4. 使用熒光顯微鏡或其他熒光成像設(shè)備進行成像和觀察。
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總結(jié)而言,Sulfo-CY5 maleimide作為巰基反應(yīng)性熒光染料,可與含有游離巰基的生物分子特異性共價結(jié)合,實現(xiàn)對生物分子的標記和檢測。這使其在生物學和醫(yī)學研究中的工具,用于探索細胞過程、蛋白質(zhì)相互作用和生物傳感等應(yīng)用。
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5-TAMRA, SE
Cy3-Concanavalin A
ICG-Dextran
RB-Dextran
CY3 amine
Sulfo-CY3 amine
Cy7-Dextran
CY5-Dextran
CY3-Dextran
6-TAMRA
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