D-熒光素鉀鹽 D-Luciferin potassium salt(D-螢光素鉀鹽;115144-35-9)是螢光素酶的底物，可催化生物發(fā)光昆蟲產(chǎn)生典型的黃綠光。D-熒光素鉀鹽 在約 530 nm 的峰值波長處發(fā)出黃綠色發(fā)光。螢光素的鹽形式溶解在水或其他典型的緩沖液中。

溶解度：易溶于水（30 mg/mL）

性狀 Solid power，淺黃色粉末

儲藏條件：Store at 4°C,-4℃下存儲更優(yōu)

D-熒光素鉀鹽 發(fā)光原理：

D-熒光素（D-Luciferin）為熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。原理是在熒光素酶和ATP的作用下，D-Luciferin能夠被氧化發(fā)光。若存在過量的熒光素時，產(chǎn)生的光量子數(shù)和熒光素酶的濃度成正相關(guān)。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后，導(dǎo)入研究動物（如小鼠）體內(nèi)，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強(qiáng)度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)，或藥物的治療效果等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光的強(qiáng)度變化，指示能量或生命體征。

備注：在細(xì)胞體內(nèi)水環(huán)境下，D-熒光素（D-Luciferin）均是以離子形式存在，對于D-熒光素鈉鹽和鉀鹽，原理都是一樣的。

D-熒光素鉀鹽 使用方法：

一、體外生物發(fā)光檢測

1. 用無菌純凈水 對 D-熒光素鉀鹽 進(jìn)行溶解，配制 30mg/mL的 D-熒光素鉀鹽 儲備溶液 (100-200×) 搖均勻后即可使用，不能立即使用的 儲備液可進(jìn)行分裝后，在-20℃避光條件下保存，避免反復(fù)凍融，對時機(jī)活性造成影響；

2. 在37℃恒溫條件下預(yù)熱處理組織培養(yǎng)基10-20分鐘，再將處理后的培養(yǎng)基倒入儲存液中，稀釋至0.15-0.3 mg/mL（根據(jù)實驗調(diào)節(jié)濃度）的工作液濃度；

3. 之后再去除混液中的細(xì)胞培養(yǎng)基；

4. 等待圖像分析前，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液，恒溫37℃條件下孵育5-10 min，之后再進(jìn)行圖像分析。

二、活體成像分析

1. 采用無菌的 DPBS緩沖液 (w/o Mg2+、Ca2+) 配制成為：15 mg/mL的熒光素的儲存液，混勻。

2. 使用水系0.2 μm真是濾器過濾對儲備液進(jìn)行除菌處理，處理后可即使使用，或者在-20℃避光條件下保存，避免反復(fù)凍融，對時機(jī)活性造成影響；

3. 腹腔注射（i.p.）：按照 150 mg/kg 的熒光素/體重濃度比例進(jìn)行注射；

4. 注射入體內(nèi)10-15 min后（等待光信號達(dá)到最強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）之后，再進(jìn)行成像分析；

D-熒光素K+和Na+鹽通常用作螢火蟲熒光素酶底物，用于體外和體內(nèi)生物發(fā)光檢測。D-熒光素的質(zhì)量和純度對于獲得良好和可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。