GST融合蛋白Pull-down技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析
GST融合蛋白Pull-down技術(shù)也稱GST pull-down或GST pull-down融合蛋白沉降技術(shù),是在GST融合蛋白以及Pull Down技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的研究體外蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù),實(shí)質(zhì)上是一種利用谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)作為親和標(biāo)簽進(jìn)行的Pull-down實(shí)驗(yàn)。?
該技術(shù)利用基因重組技術(shù)得到GST標(biāo)記的融合蛋白,再利用GST對(duì)谷胱甘肽(GSH)偶聯(lián)磁珠的親和性將帶GST標(biāo)記的融合蛋白與谷胱甘肽偶聯(lián)磁珠結(jié)合,當(dāng)與融合蛋白有相互作用的靶蛋白通過載有該磁珠的層析柱或與該磁珠混合時(shí),靶蛋白就會(huì)與融合蛋白產(chǎn)生吸附而從蛋白混合液中分離出來,通過純化洗脫就可以得到與融合蛋白相互作用的靶蛋白。?
被GST拉下的靶蛋白利用質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步分析,即GST pull-down結(jié)合質(zhì)譜分析技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)靶蛋白的定性鑒定和確認(rèn),該蛋白可以是已知的也可以是未知的,因此,可以用于驗(yàn)證兩種已知蛋白之間可能存在的相互作用以及尋找能與已知的融合蛋白發(fā)生相互作用的未知蛋白分子。?
百泰派克生物科技基于先進(jìn)MALDI-TOF質(zhì)譜系統(tǒng)與LC-MS/MS質(zhì)譜系統(tǒng)提供專業(yè)準(zhǔn)確的GST融合蛋白Pull-down技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析服務(wù)技術(shù)包裹研究體外強(qiáng)烈或者穩(wěn)定的蛋白質(zhì)間相互作用,鑒定兩種已知的感興趣蛋白質(zhì)可能存在的直接相互作用,尋找可能與目標(biāo)蛋白存在相互作用關(guān)系的未知蛋白,還可用于表征蛋白相互作用的條件,歡迎免費(fèi)咨詢。?