T7 RNA?聚合酶是一種依賴?DNA?的?RNA?聚合酶，其對噬菌體?T7?啟動子序列有高特異性。該酶從?T7?啟動子插入到轉(zhuǎn)錄載體下游的?DNA?上合成大量?RNA?？色@取?T7 RNA?聚合酶技術(shù)公告。

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應(yīng)用：標記和未標記的?RNA?轉(zhuǎn)錄本的合成。

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來源：從在質(zhì)粒上表達?T7 RNA?聚合酶基因的大腸桿菌純化獲得。

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性能和質(zhì)量檢驗：3′ 和?5′ 脫氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和?DNA?缺口檢測；

轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中的性能。

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T7 RNA聚合酶類型：

常規(guī)型和耐熱型。常規(guī)型T7 RNA聚合酶可在37℃對模板進行高效體外轉(zhuǎn)錄，而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下進行體外轉(zhuǎn)錄。基于此耐熱的體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)特性具有以下優(yōu)勢：

1.提升了GC含量較高RNA的轉(zhuǎn)錄效率；

2.提升了長片段RNA的合成能力；

3.在使用帽類似物時，提高了共轉(zhuǎn)錄的加帽效率；

4.減少了dsRNA?副產(chǎn)物的形成，降低了合成RNA的免疫原性。

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艾美捷T7 RNA聚合酶:

英文名字：T7 RNA Polymerase

貨號：C-BSM0124

規(guī)格：5000 U / 25000 U

組成：T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer

純度：SDS-PAGE檢測結(jié)果大于95%。

核內(nèi)殘留物：將20 U T7 RNA聚合酶與超螺旋質(zhì)粒DNA在37°C下孵育4小時，DNA電泳未檢測到質(zhì)粒的變化

殘留DNA酶：將T7 RNA聚合酶與雙鏈DNA在37°C下孵育16小時，DNA電泳未檢測到DNA變化。

RNase殘基：將T7 RNA聚合酶與RNA在37°C下孵育1小時，電泳中未檢測到RNA降解

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T7 RNA聚合酶適用范圍：

1.?合成單鏈?RNA，包括?mRNA，siRNA，gRNA?等各類?RNA?的前體。

2.?合成標記或未標記的高特異性?RNA?探針。

3.?利用帽子類似物合成加帽的?mRNA。

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推薦的反應(yīng)條件：

在37°C下培養(yǎng)1小時。如果轉(zhuǎn)錄物長度小于300nt，反應(yīng)時間可以延長至2-16小時。反應(yīng)結(jié)束后，在上述20μl反應(yīng)混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶，并在37°C下孵育15分鐘以移動DNA模板