骨骼系統(tǒng)是癌癥轉(zhuǎn)移的第三大常見部位，僅次于肺和肝。許多腫瘤，尤其是乳腺、前列腺、肺和腎的腫瘤，極易轉(zhuǎn)移至骨骼，如椎骨、肋骨、髖部、股骨和脛骨。這會導致疼痛、高鈣血癥、病理性骨骼骨折、脊髓或其他神經(jīng)結構受壓、活動能力下降和增加死亡。轉(zhuǎn)移性癌癥引起的骨痛 (CIBP) 是一種慢性疼痛，骨癌痛既有傷害性的，也有神經(jīng)性的。傷害性成分是由腫瘤及其相關基質(zhì)細胞釋放致痛物質(zhì)、破壞骨的破骨細胞引起的酸中毒以及骨骼的機械不穩(wěn)定和骨折驅(qū)動的。神經(jīng)性成分是由腫瘤細胞生長引起的，腫瘤細胞生長會損傷和破壞通常支配骨骼的神經(jīng)纖維的遠端，并會引起感覺和交感神經(jīng)纖維的高度病理性萌芽。

骨痛是癌癥患者最常見的疼痛類型之一，大約30-50%的癌癥患者會經(jīng)歷疼痛，75-90%的晚期癌癥患者會經(jīng)歷實質(zhì)性的、改變生活的癌癥誘發(fā)疼痛。

原理：

骨轉(zhuǎn)移部位腫瘤細胞、成骨細胞、破骨細胞、基質(zhì)細胞和炎癥細胞之間的相互作用。腫瘤細胞釋放內(nèi)皮素 (ET)，內(nèi)皮素通過其適當?shù)氖荏w與成骨細胞相互作用以刺激其增殖?；罨某晒羌毎尫?RANKL，而 RANKL 反過來又為破骨細胞的增殖和成熟提供信號，從而對骨骼產(chǎn)生破壞性影響。破骨細胞產(chǎn)生 ATP 和誘導酸中毒的 H +，從而激活位于骨神經(jīng)支配神經(jīng)元上的適當受體（P2X、TRPV1、ASICS3）。此外，腫瘤細胞、基質(zhì)細胞和活化的免疫細胞分泌多種介質(zhì)（內(nèi)皮素、前列腺素、NGF、緩激肽、促炎細胞因子、趨化因子、H +和 ATP），激活位于骨神經(jīng)纖維末端的適當受體（內(nèi)皮素受體、前列腺素受體、TrkA 受體、緩激肽受體、細胞因子受體、趨化因子受體、TRPV1、ASIC3、P2X3）。這些受體有助于檢測有關傷害性刺激的信號并將其傳輸?shù)郊顾瑁缓髠鬏數(shù)桨l(fā)生感知的大腦皮層。

小鼠建模方法：

小鼠骨轉(zhuǎn)移性癌痛模型通過給C57BL/6J小鼠股骨骨髓內(nèi)注射Lewis肺癌細胞建立骨轉(zhuǎn)移性癌痛模型。建模方法如下：

1.小鼠麻醉，側(cè)臥位放置，剃毛，消毒；

2.彎曲膝關節(jié)，可見白色髕韌帶。用3號注射器針頭繞過髕韌帶，從近髁間窩位置進針，按股骨長軸方向鉆孔進入股骨骨髓腔；

3.換用微量進樣器(依次吸取2μL空氣+5μL腫瘤細胞)向骨髓腔內(nèi)接種腫瘤細胞(1×10*6個，細胞密度達到2×10*8個)，留針片刻后退出針頭，無菌棉簽沾生理鹽水清洗傷口，酒精棉球擦拭傷口處進行消毒;

4.Sham組只用3號注射器針頭進針打孔，Con組不做任何處理；

5.動物修養(yǎng)，使腫瘤細胞在骨腔中增殖。

大鼠建模方法：

大鼠骨轉(zhuǎn)移性癌痛模型通過給大鼠脛骨骨腔注射Walker256乳腺癌癌細胞建立骨轉(zhuǎn)移性癌痛模型，建模方法如下：

1.大鼠麻醉后，側(cè)臥位放置在手術臺上；

2.右側(cè)后肢膝關節(jié)處剪毛備皮，在髕骨皮膚做一切口；沿髕韌帶開口，暴露脛骨頭，髁間突出處用7號注射器針頭進針打孔，進入膝關節(jié)以下骨髓質(zhì)腔約7mm；

3.移除打孔針頭，使用微量進樣器抽取Walker256乳腺癌細胞（2×10*5個細胞）從打孔處進入大鼠脛骨骨腔，將腫瘤細胞緩慢注射入脛骨骨腔中，一邊注射一邊向外拔針。注射完畢后停針3min再緩慢將微量進樣器拔出（避免拔針時將細胞帶出）；

4.微量進樣器拔出后，縫合皮膚并消毒；

5.動物修養(yǎng)，使腫瘤細胞在骨腔中增殖。

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