細胞學堂 | 盤點細胞培養(yǎng)中的常用培養(yǎng)耗材
在細胞培養(yǎng)中,最常使用的培養(yǎng)耗材就是培養(yǎng)基/皿以及多孔板,本期小普為大家整理了各個培養(yǎng)器皿的介紹及使用說明,供大家參考學習。
培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿??
培養(yǎng)瓶通常以它們的底面積命名(如25cm2,通??s寫為T25),而培養(yǎng)皿一般用直徑大小命名(如10cm)。二者的制作材料幾乎全部為組織培養(yǎng)處理型聚苯乙烯。
若需要的細胞量較大,僅靠增加常規(guī)培養(yǎng)瓶大小和數(shù)量頗為麻煩,在這種情況下,需要使用特制的器皿,如多層細胞培養(yǎng)瓶;
若需要更高的細胞產(chǎn)量,則要用大型的多表面擴增器或放在專用支架上的旋轉培養(yǎng)瓶;
若需增加懸浮生長細胞的產(chǎn)量,則增加培養(yǎng)基的體積,并不斷攪動深層培養(yǎng)物、通入含5%CO2的氣體。
多孔板??
進行微量的多次重復實驗時最好使用多孔板,它帶有許多小孔,如帶有96-1536個孔的微量板,或帶有4-24個孔的多孔板。多孔板一般由透明的聚苯乙烯制成,微孔板的生長區(qū)可以是透明的,也可以是白色或者黑色。組織培養(yǎng)處理型多孔板為平底,而非組織培養(yǎng)處理型細胞板為錐形底或圓底。
當使用普通的寬松蓋子培養(yǎng)細胞時,細胞板邊緣的蒸發(fā)和氣體交換的速率會比中間孔快,從而形成所謂的邊緣效應,通常我們會在96孔板的邊緣加一圈PBS,以避免邊緣效應。
細胞培養(yǎng)常見耗材的加液體積和建議接種量如下表所示:

注意事項
◆?建議接種量按照常規(guī)細胞推薦,如果細胞個頭偏大或者偏小,都需要根據(jù)實際情況進行調(diào)整;
◆?細胞傳代培養(yǎng)的比例通常說的是同等大小容器的比例,如果換到大的容器,需要換算面積。
參考文獻
[1]弗雷謝尼, 章靜波, 徐存拴. 動物細胞培養(yǎng)[M]. 科學出版社, 2004.