細(xì)胞攻略 | RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 培養(yǎng)教程
細(xì)胞基本信息

細(xì)胞名稱:? RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:? RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7
細(xì)胞貨號(hào):? SNL-112
生長(zhǎng)特性:? 半貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)條件:? ?DMEM+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)環(huán)境:? 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%;37℃
細(xì)胞簡(jiǎn)介:? RAW 264.7細(xì)胞是從Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)誘導(dǎo)的腫瘤中建立的雄性小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞系,Raschke等人于1976年首次報(bào)道了該細(xì)胞系。RAW 264.7細(xì)胞sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW 264.7細(xì)胞不分泌可檢測(cè)到的病毒顆粒,XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。根據(jù)Janet W.Hartley博士在2008年發(fā)表的一項(xiàng)研究,RAW 264.7細(xì)胞被證明表達(dá)生態(tài)性和多向性MuLV,并且使用XC噬斑試驗(yàn)對(duì)病毒復(fù)制呈陽性。RAW 264.7細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖,并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)RAW 264.7細(xì)胞分解紅血球,但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無作用。RAW 264.7細(xì)胞易于繁殖,DNA轉(zhuǎn)染效率高,對(duì)RNA干擾敏感,并支持小鼠諾如病毒的復(fù)制,可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng)、免疫系統(tǒng)紊亂和免疫學(xué)研究,也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。
RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 存在少量分化細(xì)胞
RAW264.7細(xì)胞形態(tài)主要為圓形。因其對(duì)環(huán)境非常敏感,在培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)少量短梭形或多角形的分化細(xì)胞,這是正?,F(xiàn)象。分化的細(xì)胞貼壁牢固,而未分化的細(xì)胞貼壁松散。根據(jù)貼壁松緊差異,可將未分化的細(xì)胞吹下,并轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。
2. 對(duì)胰酶敏感
RAW264.7細(xì)胞對(duì)胰蛋白酶敏感,接觸胰酶后將很快發(fā)生自發(fā)分化,貼壁變緊,很難消化下來。所以不建議用胰酶對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行傳代。(詳細(xì)傳代步驟見下文)
3. 生長(zhǎng)較快
RAW264.7細(xì)胞生長(zhǎng)速度較快,建議每天觀察細(xì)胞密度,當(dāng)細(xì)胞密度到達(dá)80%時(shí)及時(shí)進(jìn)行傳代,以防細(xì)胞過度生長(zhǎng)狀態(tài)變差。