一、過濾
如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物，血清將很難過濾。一般說來，因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時(shí)后已經(jīng)經(jīng)過100nm或者40nm的過濾處理，并且經(jīng)過了嚴(yán)格的無菌檢測(cè)，因此不推薦再過濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。在實(shí)驗(yàn)室中沒有必要再過濾處理血清，在大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。

我們?cè)谶@里為大家列舉了幾條我們應(yīng)該如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？

1.解凍時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一；

2.分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻（小心勿造成氣泡）；

3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍，較大的溫差，易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀；

4.切勿將血清置于37℃過長(zhǎng)時(shí)間，否則可能使之渾濁，其中一些不穩(wěn)定的組分也會(huì)因此受到影響，最終降低血清的品質(zhì)；

5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟；

6.若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且保持搖晃均勻。溫度過高、時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

二、污染

磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭(zhēng)端。研究者可能會(huì)在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會(huì)比較警覺的去做無菌試驗(yàn)，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會(huì)觀察到更多的絮狀沉淀，因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時(shí)往往可以看到一些可以運(yùn)動(dòng)的小黑點(diǎn)，因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是，研究者就會(huì)花費(fèi)更多的時(shí)間和精力來和生產(chǎn)商確認(rèn)，但終確定血清沒有被污染而只是沉淀。

例如在胎牛血清中：

沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于胎牛血清自身中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后，也會(huì)存在于胎牛血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不會(huì)影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若執(zhí)意相要去除這些絮狀沉淀物，可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。

此外：為了避免這些問題的發(fā)生，我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌，而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。另外，也可以進(jìn)行革蘭氏染色，在油鏡下觀察，以確認(rèn)是否有污染。