「青蓮快訊」青蓮百奧引進(jìn)賽默飛之作——全能王Orbitrap Eclipse三合一質(zhì)譜儀
「青蓮快訊」青蓮百奧引進(jìn)賽默飛之作——全能王Orbitrap Eclipse三合一質(zhì)譜儀
? ? 賽默飛重磅推出三合一系列的創(chuàng)新之作——Thermo Scientific? Orbitrap Eclipse??質(zhì)譜儀,旨在解決生物學(xué)研究中的分析難題,輕松應(yīng)對蛋白質(zhì)組學(xué),生物制藥與蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)分析研究中的各項(xiàng)挑戰(zhàn)。自2013年推出第一代三合一Orbitrap Fusion質(zhì)譜儀開始,該系列完美整合了四極桿、離子阱和Orbitrap質(zhì)量分析器的多功能性和可用性,具有超高分辨率、靈敏度、穩(wěn)定的高質(zhì)量精度,以及多項(xiàng)可延展性等優(yōu)點(diǎn)。
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PART.1 硬件結(jié)構(gòu)及提升
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性能比尖通用萬間
1、QR5分段式四極桿質(zhì)量過濾器:具有出色的母離子選擇性和靈敏度
2、實(shí)時(shí)檢索:為TMT分析提供深度和準(zhǔn)確度
3、高質(zhì)量范圍MSn:滿足非變性蛋白組復(fù)合物的結(jié)構(gòu)分析
4、質(zhì)量轉(zhuǎn)移電荷減少技術(shù):簡化譜圖數(shù)據(jù)
5、多種可選功能滿足更多需求:IC|ETD|UVPD|1M|HMRn|PTCR|FAIMS Pro interface

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PART.2 全能王火力全開
1、單細(xì)胞蛋白組的應(yīng)用
? ? “Improved Single-Cell Proteome Coverage Using Narrow-Bore Packed NanoLC Columns and Ultrasensitive Mass Spectrometry”一文作者在單細(xì)胞蛋白組學(xué)技術(shù)研究中將先前開發(fā)的?nanoPOTS?平臺與液相色譜 (LC) 分離的系統(tǒng)進(jìn)一步小型化,并且結(jié)合使用了超靈敏的一代質(zhì)譜儀Orbitrap Eclipse Tribrid。在?nanoPOTS?樣品制備后,使用?20 μm?內(nèi)徑nanoLC?柱中對單個(gè)細(xì)胞蛋白質(zhì)消化物進(jìn)行分析。使用?Orbitrap Eclipse Tribrid?質(zhì)譜儀實(shí)現(xiàn)了超靈敏?LC-MS?分析,單個(gè)?HeLa?細(xì)胞平均鑒定出?874?個(gè)蛋白質(zhì)組。這代表無標(biāo)記單細(xì)胞蛋白質(zhì)組覆蓋率相對于先前使用更大內(nèi)徑(30 μm?內(nèi)徑)LC 色譜柱與上一代?Orbitrap Fusion Lumos?質(zhì)譜儀耦合的工作增加了70%以上。
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? ? ?“Ultrasensitive single-cell proteomics workflow identifies >1000 protein groups per mammalian cell”一文中作者使用納米液滴樣品制備、超低流量納升液相色譜、FAIMS和新一代?Orbitrap Eclipse Tribrid?質(zhì)譜儀的組合,大大改進(jìn)單細(xì)胞蛋白質(zhì)組分析。FAIMS?有效地過濾掉了單電荷離子,以便對多電荷肽進(jìn)行更有效的?MS?分析,從單個(gè)?HeLa?細(xì)胞中識別出平均?1056?個(gè)蛋白質(zhì),是之前報(bào)道過的最高水平。
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青蓮百奧單細(xì)胞組學(xué)技術(shù)
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?實(shí)驗(yàn)流程

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?實(shí)驗(yàn)流程

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2、?生物藥表征
? ? ? ?通過middle-down質(zhì)譜法分析單克隆抗體?(mAb)?是一個(gè)不斷發(fā)展的領(lǐng)域,吸引了許多研究人員和生物制藥公司的注意。通常,在MS?分析之前,使用液體分級技術(shù)分離?mAb?多肽鏈。使用FAIMS等氣相分餾技術(shù)可以替代液基分離并減少分析時(shí)間和成本。
? ? ?“Direct measurement of light and heavy antibody chains using ion mobility and middle-down mass spectrometry”,作者提出了一種快速的?FAIMS?搭配超靈敏的新一代質(zhì)譜儀Orbitrap Eclipse Tribrid的串聯(lián)質(zhì)譜方法,能夠以簡單和快速的方式表征?mAb?輕鏈和重鏈的多肽序列。這種新方法使用不同的解離方法獲取碎片數(shù)據(jù)需要大約?24?分鐘,比常規(guī)液相色譜-MS/MS?分析快?40-60%。

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? ? ? ??輕鏈氨基酸序列覆蓋度為57%,重鏈氨基酸序列覆蓋度為36%,碎片離子質(zhì)量偏差在3ppm以內(nèi),Orbitrap Eclipse?在非變性條件下Top-Down結(jié)果刷新了以往的記錄。
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青蓮百奧生物藥表征項(xiàng)目目錄

3、生物藥表征平臺
高分辨質(zhì)譜法(EMR)分子量檢測方法;序列覆蓋度;質(zhì)譜法HCP覆蓋度;N/C端測序
等電點(diǎn);肽指紋圖譜;排阻色譜法純度測定
二硫鍵;氨基酸組成
圓二色譜;DSC測定;SDS-PAGE;CE-SDS
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? ? ? ?青蓮百奧可提供一站式蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、多組學(xué)聯(lián)合分析等科研服務(wù)。青蓮百奧在質(zhì)譜檢測方面項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)豐富,擁有國際的質(zhì)譜平臺,海歸坐鎮(zhèn)專業(yè)生信分析團(tuán)隊(duì),助您在科研道路上乘風(fēng)破浪,沖擊高水平文章。
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