通過病毒載體傳遞基因的一個(gè)特殊挑戰(zhàn)是病毒滴度的準(zhǔn)確測(cè)量。傳統(tǒng)上，腺相關(guān)病毒（adeno-associatedvirus，AAV）顆粒是通過DNA斑點(diǎn)印跡或類似方法測(cè)量的。這些方法非常耗時(shí)，并且存在高度的測(cè)定間變異性。對(duì)于高度純化的病毒樣本，260nm處的吸光度已用于估計(jì)病毒顆粒的總數(shù)。然而，這種方法不能用于未純化的病毒上清液，因?yàn)樗钠渌煞謺?huì)導(dǎo)致260nm的吸光度。通過使用僅與AAV完整顆粒反應(yīng)的抗體開發(fā)了一種ELISA方法；然而，這種方法測(cè)量所有AAV顆粒，包括那些缺乏基因組DNA的顆粒。

?

眾多高分文章引用的，適用于任何血清型的純化AAV，以及未純化的AAV-2和AAV-DJ型腺相關(guān)病毒（AAV）滴度檢測(cè)試劑盒來助力。

?

艾美捷?腺相關(guān)病毒（AAV）滴度檢測(cè)試劑盒組分：

1.ViraBind AAV Reagent A

2.ViraBind AAV Reagent B

3.QuickTiter AAV Capture Matrix

4.QuickTiter AAV Wash Solution (5X)

5.QuickTiter Solution C (10X)

6.CyQuant GR Dye (400X)

7.QuickTiter AAV DNA Standard

?

實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢(shì)：

1.簡(jiǎn)單快捷：未純化的上清液大約需要?4?小時(shí)，對(duì)于純化的?AAV?大約需要?30?分鐘；

2.樣本適用：檢測(cè)任何血清型的純化AAV，以及未純化的AAV-2和AAV-DJ型

3.靈敏度：可檢測(cè)1X109GC/ml的AAV的細(xì)胞上清；檢測(cè)5X1010GC/ml的純化的AAV。

?

原理：

標(biāo)曲：

部分近期發(fā)表文章：

?

1.Francisco, J. et al. (2021). AAV-mediated YAP expression in cardiac fibroblasts promotes inflammation and increases fibrosis. Sci Rep. 11(1):10553. doi: 10.1038/s41598-021-89989-5.

2.Kwon, O.C. et al. (2021). SGK1 inhibition in glia ameliorates pathologies and symptoms in Parkinson disease animal models. EMBO Mol Med. doi: 10.15252/emmm.202013076.

3.Lebeau, P.F. et al. (2020). The loss-of-function PCSK9Q152H variant increases ER chaperones GRP78 and GRP94 and protects against liver injury. J Clin Invest. doi: 10.1172/JCI128650.

4.Kawaguchi, Y. et al. (2020). Endoplasmic reticulum chaperone BiP/GRP78 knockdown leads to autophagy and cell death of arginine vasopressin neurons in mice. Sci Rep. 10(1):19730. doi: 10.1038/s41598-020-76839-z.

5.Rai, R. et al. (2020). Targeted gene correction of human hematopoietic stem cells for the treatment of Wiskott - Aldrich Syndrome. Nat Commun. 11(1):4034. doi: 10.1038/s41467-020-17626-2.

6.Zeng, J. et al (2020). The Zika Virus Capsid Disrupts Corticogenesis by Suppressing Dicer Activity and miRNA Biogenesis. Cell Stem Cell. S1934-5909(20)30350-7. doi: 10.1016/j.stem.2020.07.012.

?

Cell Biolabs產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的腺相關(guān)病毒（AAV）滴度檢測(cè)試劑盒。