比色免疫酶免疫測定:Enzo 蛋白A ELISA試劑盒方案
艾美捷?Enzo蛋白A ELISA試劑盒是一種比色免疫酶免疫測定試劑盒,可在?< 3?小時內(nèi)獲得結(jié)果。在?450 nm?處讀取吸光度。對純化的人源化單克隆抗體制劑中的蛋白?A?殘留物進行超靈敏定量?(< 1 ppm)。該試劑盒可識別四種不同的蛋白?A?構(gòu)建體。
?
艾美捷?Enzo蛋白A ELISA試劑盒特點:
1、高靈敏度測量,可檢測純化的人源化?mAb?制劑中低至?9.01 pg/ml (<1 ppm)?的蛋白?A?殘留物
2、確保準確的結(jié)果,因為它可以識別多種蛋白?A?構(gòu)建體
3、高通量格式,可在?< 3?小時內(nèi)獲得多達?37?個一式兩份樣品的結(jié)果
4、與其他技術(shù)相比具有成本效益的解決方案,提供更低的每次測試成本
5、可用于單克隆抗體制劑中蛋白?A?變體的污染分析和測量
?
艾美捷?Enzo蛋白A ELISA試劑盒化學性質(zhì):
靈敏度:9.01 pg/ml(范圍?15.63 - 1,000 pg/ml)
檢測時間:<3?小時
應(yīng)用:ELISA,比色檢測
應(yīng)用說明:用于定量測定來自任何物種的蛋白?A?純化?IgG?制劑中殘留的蛋白?A?污染。
波長:450?納米
物種反應(yīng)性:物種獨立
船運:藍冰未冷凍
長期儲存:+4°C
內(nèi)容:微量滴定板、偶聯(lián)物、抗體、測定緩沖液?13、濃縮洗滌緩沖液、標準品、TMB?底物、終止溶液?2
科學背景:金黃色葡萄球菌蛋白?A?是一種?42 kDa?的細胞壁成分,其特點是與某些免疫球蛋白的?Fc?部分具有結(jié)合親和力,尤其是?IgG?類。IgG?結(jié)合結(jié)構(gòu)域(結(jié)構(gòu)域?B)由三個反平行 α 螺旋組成,當?shù)鞍踪|(zhì)與?Fc?復合時,其中第三個被破壞。蛋白?A?通常用于純化抗血清以及常用的免疫檢測和可視化技術(shù)。蛋白?A?參與許多保護性生物學功能,包括抗腫瘤、毒性和致癌活性,因此需要從抗體制劑中去除潛在的蛋白?A?污染物以用于治療用途。
技術(shù)信息說明:對來自金黃色葡萄球菌(M)的天然蛋白?A、來自大腸桿菌(R)?的重組蛋白?A、來自大腸桿菌(G)的重組半胱氨酸蛋白?A和重組耐堿蛋白?A的不同蛋白?A?構(gòu)建體的檢測識別對來自大腸桿菌(S)?的變體進行了測試,所得濃度從試劑盒標準曲線中插值并顯示在所提供的圖中。
?

圖:煮沸后不同蛋白?A?構(gòu)建體的測定識別。從試劑盒標準曲線內(nèi)插得到的濃度。通過將觀察到的濃度除以預期濃度來計算回收率百分比。A:來自金黃色葡萄球菌(Millipore)的天然蛋白A,n=9;B:來自大腸桿菌(Repligen)的重組蛋白A,n=9;C:來自大腸桿菌(GE)的重組半胱氨酸蛋白A?,n=12;D:來自大腸桿菌的重組抗堿性蛋白?A?變體(來自?GE?的?MabSelet SuRe),n = 12;圖形數(shù)據(jù)代表統(tǒng)計平均值?+/- 1?標準偏差。
?
文獻參考:
1、An enhanced regeneration strategy to improve microbial control and prolong resin lifetime for Protein A resin in large-scale monoclonal antibody (mAb) purification: T. Zhou, et al.; J. Biotechnol. 289, 118 (2019), Application(s): ELISA using antibody preparation, Abstract;
2、Indirect monitoring of protein A biosynthesis in E.coli using potentiometric multisensor system: D. Kirsanov, et al.; Sensors and Actuators B: Chemical 238, 1159 (2017), Application(s): Measurement of Protein A,