結合疫苗載體蛋白N/C端序列分析
結合疫苗,或稱為偶聯疫苗,如肺炎鏈球菌疫苗,是一種特殊類型的疫苗,在這種疫苗中,抗原(通常是多糖)被化學地連接到一個載體蛋白上,這個載體蛋白通常是能夠引發(fā)強烈免疫反應的蛋白質。當免疫系統檢測到這個蛋白質時,它不僅會對蛋白質產生反應,而且也會對連接的多糖產生反應。這樣,免疫系統就可
以記住這種多糖,并在未來遇到相同的病原體時迅速反應。
在疫苗研究和開發(fā)中,N端和C端序列分析對于研究疫苗目標蛋白質的結構和功能非常重要,蛋白的N端和C端區(qū)域可能包含重要的抗原決定簇(也就是引發(fā)免疫反應的部分),對這些區(qū)域的序列分析可以幫助研究者確定哪些片段可能在疫苗設計中最有用。序列分析可能揭示某些區(qū)域在病原體的生命周期或感染過程中起關鍵作用,比如細菌的黏附或病毒的融合和進入宿主細胞。這些信息可以用來開發(fā)針對這些關鍵過程的疫苗。
蛋白質N端和C端測序通常使用質譜法進行,尤其是串聯質譜,通過LC-MS/MS采集的氨基酸質譜數據與理論氨基酸序列進行匹配,進而確認蛋白N/C端序列。此外,蛋白質N端和C端氨基酸序列還可以通過專有的方法進行鑒定,N端測序法如Edaman降解法,C端測序法如羧肽酶法、化學法。每種方法都有各自的有缺點,結合多種不同的測序方法能夠適應多種蛋白質測序的要求。比如Edman降解法不能解決N端封閉和蛋白質修飾的測序問題,當遇到這種情況的時候可以通過質譜法對其進行分析。

生物制品表征N/C端測序示意圖
百泰派克生物科技(BTP)采用ISO9001認證質量控制體系管理實驗室,獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務。我們可為您提供基于高分辨質譜平臺以及島津公司Edman測序系統的結合疫苗N/C端序列分析服務。以質譜為基礎的N端測序技術可以實現對N端封閉和PEG化蛋白的序列測定,與Edman測序形成互補。此分析可以用于確認結合疫苗的載體蛋白是否得到完整表達、表達過程是否發(fā)生斷裂,以及載體蛋白N端和C端序列是否發(fā)生修飾等。百泰派克生物科技(BTP)還可根據需求提供定制化技術服務,歡迎免費咨詢。
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