艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒檢測原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被免疫球蛋白G4(lgG4)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白G4(0G4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(0D值),計算樣品濃度。
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艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1.血清:便用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中免任何緇胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離10分鐘去除顆粒和聚合物
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離10分鐘取上清
5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,遐免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍
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自備物品:
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-100uL
3.37℃恒溫箱
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艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒操作注意事項:
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衝20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗澡液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)品完全溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4.嚴格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
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艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒化學(xué)性質(zhì):
同義詞:人?IgG4?免疫測定?EIA?試劑盒
檢測限:1.1?納克/毫升
檢測范圍:7.8-500?納克/毫升
量化下限:7.8?納克/毫升
貯存:4°C
船運:美國大陸的濕冰;其他地方可能會有所不同
穩(wěn)定:≥?6?個月
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