什么是胱天蛋白酶？

?

胱天蛋白酶（Caspases）是含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶，它們是為細(xì)胞凋亡的主要介質(zhì)。多種受體，例如TNF-α 受體，F(xiàn)asL受體，TLR和死亡受體，以及Bcl-2和凋亡抑制劑（IAP）蛋白家族參與并調(diào)節(jié)該caspase依賴性凋亡途徑。一旦Caspase受到上游信號(hào)（外部或內(nèi)在）刺激被激活，即會(huì)參與執(zhí)行下游蛋白底物的水解作用，并觸發(fā)一系列事件，導(dǎo)致細(xì)胞分解，死亡，吞噬作用和細(xì)胞碎片的清除。

?

艾美捷?AAT Bioquest：

反應(yīng)熒光探針和發(fā)光探針，生物素和端粒酶能夠應(yīng)用于標(biāo)記藥物小分子和生物聚合物，如蛋白、核酸以及其他碳水化合物；

熒光和發(fā)光探針用于檢測(cè)蛋白，核酸和活細(xì)胞。

新型的熒光和發(fā)光探針用于檢測(cè)多種酶，特別是檢測(cè)水解酶和氧化還原酶類；

開(kāi)發(fā)用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的試劑；

生理和神經(jīng)探針，特別是鈣離子指示劑和膜電位探針。

?

AAT Bioquest?人Caspases酶

?

人的Caspases家族基于序列相似性和生物學(xué)功能等共性主要可分為三大類：類由具有長(zhǎng)胱天蛋白酶募集結(jié)構(gòu)域的“炎癥”胱天蛋白酶組成，他們對(duì)P4位上的較大的芳香族或疏水性殘基具有親和力。第二類由具有短的前體結(jié)構(gòu)域的“細(xì)胞凋亡效應(yīng)”胱天蛋白酶組成，而第三類由具有長(zhǎng)的前提結(jié)構(gòu)域的Pap位置具有亮氨酸或纈氨酸底物親和力的“凋亡引發(fā)劑”胱天蛋白酶組成。

?

啟動(dòng)器Caspase和效應(yīng)器Caspase酶

?

根據(jù)其在凋亡胱天蛋白酶途徑中的作用，胱天蛋白酶可分為兩類：?jiǎn)?dòng)器和效應(yīng)器Caspase酶。啟動(dòng)器和效應(yīng)器Caspas酶都具有由小亞基和大亞基組成的催化位點(diǎn)，Caspase酶的識(shí)別位

?

凋亡啟動(dòng)器Caspase酶，例如caspase-2，-8，-9和-10可以啟動(dòng)caspase激活級(jí)聯(lián)反應(yīng)。Caspase-8對(duì)于形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物（DISC）是必不可少的，并且在激活后，Caspase-8激活下游效應(yīng)子Caspase（例如Caspase 3）并介導(dǎo)線粒體中細(xì)胞色素c的釋放。Caspase-8已被證明對(duì)IETD肽序列具有相對(duì)較高的底物選擇性。凋亡效應(yīng)胱天蛋白酶例如Caspase-3，-6和-7雖然不負(fù)責(zé)啟動(dòng)級(jí)聯(lián)途徑，但是當(dāng)被激活時(shí)，它們?cè)诩?jí)聯(lián)的中間和后續(xù)步驟中起著不可或缺的作用。Caspase-3（CPP32 / apopain）是關(guān)鍵效應(yīng)器，因?yàn)樗糯罅藖?lái)自啟動(dòng)器Caspase的信號(hào)，使用對(duì)Caspase-3有選擇性的DEVD肽序列對(duì)活化的Caspase-3進(jìn)行檢測(cè)，可以檢測(cè)Caspase-3的活性。

?

AAT Bioquest丨Caspase酶底物和抑制劑

?

Caspase底物和抑制劑由兩個(gè)關(guān)鍵成分組成：Caspase識(shí)別序列和信號(hào)產(chǎn)生或蛋白酶抑制基序。

?

Caspase的底物及其序列

多肽?氨基酸序列?對(duì)應(yīng)的Caspase的種類

IETD?Ile-Glu-Thr-Asp?Caspase 8，顆粒酶B

DEVD?Asp-Glu-Val-Asp?Caspase 3、6、7、8或10

LEHD?Leu-Glu-His-Asp?Caspase 9

VAD?Val-Ala-Asp?Caspase 1、2、3、6、8、9或10

?

Caspase酶的顯色底物

底物?Caspase?吸收（nm）?顏色?規(guī)格?貨號(hào)

Ac-DEVD-pNA * CAS 189950-66-1 *?半胱天冬酶3?405 nm?黃色?5 mg?13405

Z-DEVD-pNA?半胱天冬酶3?405 nm?黃色?5 mg?13422

Z-IETD-pNA * CAS 219138-21-3 *?半胱天冬酶8，顆粒酶B?405 nm?黃色?5 mg?13413

?

AAT Bioquest丨Caspase的熒光底物

?

Caspase的熒光底物的結(jié)構(gòu)包含與半胱天冬酶識(shí)別相關(guān)的熒光團(tuán)，例如7-氨基-4-甲基香豆素（AMC），7-氨基-4-三氟甲基香豆素（AFC），?Rhodamine 110（R110）或ProRed?620。R110的Caspase底物比基于香豆素的Caspase底物（例如AMC和AFC）更敏感，但由于兩步裂解過(guò)程，其動(dòng)態(tài)范圍更窄。 建議將R110標(biāo)記的Caspase底物用于終點(diǎn)法測(cè)定，而將AMC和AFC標(biāo)記的?Caspase底物用于動(dòng)力學(xué)測(cè)定。

?

以上就是艾美捷?AAT Bioquest丨Caspases酶系列底物及抑制劑的相關(guān)介紹啦

?

艾美捷科技是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。