Biogradetech基質(zhì)膠如何選擇以及分裝注意事項
Biogradetech基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取的基底膜基質(zhì)(Basement Membrane, BM)。細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)是多細(xì)胞有機(jī)體中細(xì)胞周圍由多種大分子組成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。 ??
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Biogradetech基底膜基質(zhì)(Basement Membrane Matrix)是一種可溶性的基質(zhì)膠。它通過基因編輯技術(shù)將多種表達(dá)膠原蛋白的基因序列插入經(jīng)過永生化處理的小鼠腫瘤細(xì)胞系中制備而成。隨后,將這些細(xì)胞系接種到小鼠體內(nèi)形成移植瘤,并通過多道純化工藝提取蛋白混合物。該基質(zhì)的主要成分包括層粘連蛋白、膠原蛋白IV、硫酸肝素糖蛋白和巢蛋白,還包括TGF-β、EGF、IGF-1、bFGF和基質(zhì)金屬蛋白酶等,以及在腫瘤中自然出現(xiàn)的其他生長因子。這些蛋白混合物在37℃條件下形成凝膠,為細(xì)胞的3D生長提供了適宜的伸展空間和豐富的營養(yǎng)物質(zhì),有利于各種類型的細(xì)胞進(jìn)行3D生長和誘導(dǎo)分化。在室溫條件下,基質(zhì)膠能夠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有助于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。 ?

如何選擇3D細(xì)胞培養(yǎng)中合適的基質(zhì)膠?
貨號?英文名稱?中文名稱?應(yīng)用類型
A-MGL01?Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For Organoid/3D cell culturing)?低生長因子,基質(zhì)膠(類器官,3D培養(yǎng))?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL03?Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced, Phenol Red-free ( For Organoid/3D cell culturing)?低生長因子,無酚紅,基質(zhì)膠(類器官,3D培養(yǎng))?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL04?Standard Basement Membrane Matrix (For Cell differentiation, migration, invasion, and angiogenesis)?標(biāo)準(zhǔn)型,基質(zhì)膠(細(xì)胞分化、遷移、侵襲、血管生成)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL06?Standard Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free (For Cell differentiation, migration, invasion, and angiogenesis)?標(biāo)準(zhǔn)型,無酚紅,基質(zhì)膠(細(xì)胞分化、遷移、侵襲、血管生成)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL21?HC Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For in vivo experiments, PDX and CDX)?高濃度,低生長因子,基質(zhì)膠(體內(nèi)實驗,PDX/CDX?異種移植)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL23?HC Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced, Phenol Red-free (For in vivo angiogenesis)?高濃度,低生長因子,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)血管生成)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL24?HC Basement Membrane Matrix (For in vivo experiments, PDX and CDX)?高濃度,基質(zhì)膠(體內(nèi)實驗,PDX/CDX?異種移植)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL26?HC Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free (For in vivo experiments, PDX and CDX)?高濃度,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)實驗,PDX/CDX?異種移植)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL55?For Organoid Culture, Basement Membrane Matrix?類器官專用,基質(zhì)膠(腸道/肺/腦/腫瘤類器官等)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
A-MGL77?For IPSC/Stem Cell, Basement Membrane Matrix?干細(xì)胞專用,基質(zhì)膠(體外/體內(nèi),干細(xì)胞分化)?藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)
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重要Tips:處理基質(zhì)膠時,保持低溫!
Biogradetech基質(zhì)膠在低于10°C的溫度下,由于能量不足無法促使共價鍵結(jié)合,因此呈現(xiàn)液體狀態(tài)。而在22℃至37℃之間,它的大分子間的共價鍵可以快速結(jié)合并聚合成膠體,形成凝膠狀。這種凝膠化的基質(zhì)膠不僅作為細(xì)胞的重要底物,有利于細(xì)胞附著和提供支架和營養(yǎng)物質(zhì),還具備類似于體內(nèi)環(huán)境的微環(huán)境,有助于細(xì)胞的3D生長?;|(zhì)膠的濃度和完整性常常會影響體外細(xì)胞的行為。因此,在使用基質(zhì)膠時,選擇適當(dāng)?shù)奶幚矸椒ê桶环椒ㄊ侵陵P(guān)重要的,這有助于提高2D和3D培養(yǎng)方法的穩(wěn)定性并改善細(xì)胞的行為。
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由于Biogradetech基質(zhì)膠在超過10°C的條件下會開始凝膠化,我們建議在分裝和使用基質(zhì)膠時采用基質(zhì)膠分裝低溫指示冰盒、吸頭預(yù)冷低溫指示冰盒、移液管、吸頭和離心管等器具。當(dāng)Biogradetech基質(zhì)膠處于液體狀態(tài)時,可以輕松進(jìn)行稀釋和其它操作。但需要注意的是,2至8°C溫度的波動可能會導(dǎo)致Biogradetech基質(zhì)膠發(fā)生微小的物理性質(zhì)變化。這些變化最終可能會影響所培養(yǎng)的細(xì)胞的健康生長、分化和運動能力。 ??
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在分裝Biogradetech基質(zhì)膠時,需要注意如下:
將基質(zhì)膠儲存在-20℃的條件下可以保持其穩(wěn)定性。建議將基質(zhì)膠分裝成最小使用量(通常為200μL或500μL),并儲存在-20℃的冰箱中備用。請避免將其儲存在自動除霜的冰箱中。
將Biogradetech基質(zhì)膠插入碎冰中,然后放置于4°C的冰箱中,在冰上過夜進(jìn)行解凍,這樣可以在穩(wěn)定的低溫環(huán)境中緩慢而充分地使基質(zhì)膠融化。
Biogradetech基質(zhì)膠在4°C的冰箱中存放時間不應(yīng)超過一天。
在使用之前,所有需要使用的耗材和工具都必須在冰上進(jìn)行預(yù)冷處理,盡量保持操作的迅速進(jìn)行。
在稀釋基質(zhì)膠時,建議使用在冰上預(yù)冷的無血清培養(yǎng)基或pH值為7.4的PBS溶液。