雌激素性垂體瘤動(dòng)物模型【疾病動(dòng)物模型】
雌激素性垂體瘤動(dòng)物模型【疾病動(dòng)物模型】
【造模機(jī)制】雌激素可以誘發(fā)垂體瘤,但機(jī)制尚不十分清楚,可能的原因有:雌激索域弱或消除了下丘腦結(jié)節(jié)漏斗束多巴胺能神經(jīng)元對(duì)泌乳素(PRL)分泌的抑制作用雌激素直接作用于腺垂體腺組織的雌激素受體;雌激素通過(guò)調(diào)控雄激素應(yīng)答基因(PTTG),堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá),在泌乳素腺瘤發(fā)生的早期分子機(jī)制中起作用。
【造模方法】
1.動(dòng)物和菌液選用 Wistar 大鼠,體重(90士10)g。己烯雌酚(DES,Sigma 公司)。
2.模型制備 按 5mg/kg 的劑量于大鼠腹腔內(nèi)每周 2 次注射已烯雌酚,連續(xù)給藥時(shí)間12 周。分別于用藥后 2 周、4 周、8 周和12 周處死動(dòng)物,采眼眶動(dòng)靜脈血制備血清,用放射免疫分析法測(cè)定大鼠血清泌乳素水平。
3.觀察指標(biāo) 顯微鏡下取出垂體,垂體位于視交叉后下方的蝶鞍內(nèi),表面有腦膜覆蓋。兩側(cè)為三叉神經(jīng):稱(chēng)取垂體重量,觀察垂體有無(wú)出血,壞死,剔除神經(jīng)垂體(位于垂體中央,有包膜,易與腺垂體分離);將腺垂體用 4%多聚甲醛固定,制備大鼠垂體組織常規(guī)病理切片,光鏡下觀察形態(tài)學(xué)變化。
【模型特點(diǎn)】
1.雌性大鼠自第 2 周、雄性大鼠自第 4 周開(kāi)始垂體重量逐漸增加,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束,最終垂體重量可達(dá)正常大鼠的 4～8 倍。
2.雌性大鼠血清泌乳素自第 2 周開(kāi)始持續(xù)顯著升高,至第 8 周達(dá)到高峰;雄性大鼠血清泌乳素自第 4 周開(kāi)始持續(xù)顯著升高,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
3.第 2 周至第 4 周,垂體標(biāo)本肉眼可見(jiàn)體積增大,顏色呈灰白色,與正常垂體顏色基本相同;光鏡下垂體組織腺體排列結(jié)構(gòu)尚存,細(xì)胞體積增大,數(shù)目增多,胞核大小基本一致,核質(zhì)染色不均勻,無(wú)核異型性,呈增生性改變;免疫組化染色發(fā)現(xiàn)泌乳素細(xì)胞較對(duì)照組顯著增加,胞漿內(nèi)泌乳素含量增多。雌性 8 周至 12 周和雄性 12 周大鼠垂體體積增大更明顯,呈暗紅色,組織較軟,易碎,切面可見(jiàn)出血;光鏡下垂體組織的正常血竇間隙消失,腺體排列結(jié)構(gòu)破壞,細(xì)胞數(shù)目增多更明顯,細(xì)胞呈圓形或多角形,細(xì)胞間可見(jiàn)新生血管;胞漿帶增寬,核大小不一,深染,有核異型性,呈腫瘤性改變;免疫組化染色泌乳素陽(yáng)性細(xì)胞充滿(mǎn)視野,著色較深。
【應(yīng)用范圍】本模型建立的垂體瘤在內(nèi)分泌和免疫組織化學(xué)上和人類(lèi)泌乳素瘤相似,適用于人類(lèi)泌乳素瘤的發(fā)生機(jī)制、治療和預(yù)防措施的研究。
【注意事項(xiàng)】
1. DES必須連續(xù)給藥(如 12 周),因 DES 造模具有雌激素依賴(lài)性,隨著雌激素的持續(xù)應(yīng)用,垂體由增生性改變到腫瘤性改變,如停用則瘤體逐漸縮小以至完全消失。
2.不同性別 Wistar 大鼠均可誘發(fā)出垂體瘤,但雌鼠需要時(shí)間較短,這可能與雌激素受體的表達(dá)高低有關(guān)。
3.誘發(fā)瘤的發(fā)生率具有種屬差異性。某些種系誘發(fā)率很高,如 F344 大鼠的誘發(fā)率為100%,而另一些卻很低,如 Holtzman 大鼠的誘發(fā)率為 2%~6%。
【模型評(píng)估】雌激素誘發(fā)性垂體瘤動(dòng)物模型制作簡(jiǎn)單,可致腺垂體泌乳素細(xì)胞增生,泌乳素大量分泌,以及泌乳素腺瘤形成,與人類(lèi)泌乳素瘤相似,在垂體瘤的基礎(chǔ)研究中得到廣泛應(yīng)用,但其在發(fā)生發(fā)展中存在雌激素依賴(lài)性是本模型的不足之處。
目前,建立垂體瘤動(dòng)物模型的方法很多,如自發(fā)性垂體瘤動(dòng)物模型、雌激素誘發(fā)性垂體瘤動(dòng)物模型、可移植性垂體瘤動(dòng)物模型和轉(zhuǎn)基因垂體瘤動(dòng)物模型。但各種方法在不同程度上均有其不足之處,且很多局限于垂體泌乳素瘤,真正能完全模擬人類(lèi)垂體瘤的動(dòng)物模型還未建立。自發(fā)性垂體瘤動(dòng)物模型因其耗時(shí)長(zhǎng)、花費(fèi)較大、垂體瘤體積小、不易觀察等原因,應(yīng)用受到限制;但動(dòng)物自發(fā)性垂體瘤在形態(tài)學(xué)、組織學(xué)、內(nèi)分泌以及藥物敏感性方面均與人類(lèi)泌乳素瘤相似,且具有可移植性,這種自發(fā)性可移植性垂體瘤動(dòng)物模型在垂體瘤(主要是泌乳素瘤)的基礎(chǔ)和臨床研究上有很大的價(jià)值。可移植性垂體瘤動(dòng)物模型因其可采用的瘤株種類(lèi)多,移植途徑可變(皮下移植,腎囊內(nèi)移植和顱內(nèi)移植),可控程度高,具有獨(dú)特的優(yōu)越性,但其表現(xiàn)與人類(lèi)垂體瘤差異較大,適于治療藥物篩選方面的研究;而轉(zhuǎn)基因垂體瘤動(dòng)物模型的相繼建立為多種類(lèi)型垂體瘤的研究提供了廣闊的平臺(tái)。
文章轉(zhuǎn)載于北京吉田生物科技有限公司?可承接各種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
