蛋白質(zhì)飛行質(zhì)譜的樣品有什么要求
蛋白質(zhì)飛行質(zhì)譜檢測(cè)即基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI TOF)檢測(cè),該方法最大的特點(diǎn)在于使用基質(zhì)輔助的軟電離技術(shù)將蛋白質(zhì)/肽段電離成離子?;|(zhì)在MALDI中擔(dān)負(fù)著關(guān)鍵的角色,它不僅可以吸收激光的能量并傳遞到蛋白質(zhì)/肽段樣品中,還能保護(hù)待測(cè)樣品不受破壞而形成碎片離子。因此,在蛋白質(zhì)MALDI TOF質(zhì)譜分析中,首先要制備基質(zhì)包埋的蛋白質(zhì)樣品,通常是將基質(zhì)的飽和溶液與待檢測(cè)的蛋白樣品溶液混合,再將0.5-1ul左右的混合液加載到樣品板上,待溶劑揮發(fā)干后形成蛋白樣品和基質(zhì)的混晶,即可引入質(zhì)譜分析。對(duì)于蛋白質(zhì)、多肽、核酸或多糖類樣品,較為通用的基質(zhì)有芥子酸、2,5-羥基苯甲酸、3-羥基吡啶甲酸、α-氰基-4-羥肉桂酸等。
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