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Nanoprobes納米探針丨Nanogold偶聯(lián)物的特點(diǎn)和應(yīng)用

2022-08-01 14:12 作者:艾美捷  | 我要投稿

艾美捷?Nanoprobes?Nanogold?-抗體和鏈霉親和素偶聯(lián)物:

1.4 nm Nanogold??二抗和鏈霉親和素偶聯(lián)物

用于?EM、LM、印跡和診斷。

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艾美捷?Nanoprobes?Nanogold偶聯(lián)物的特點(diǎn):

1.最小的市售金免疫探針。

2.穿透并到達(dá)其他探針無法觸及的抗原:經(jīng)證實(shí)可穿透高達(dá)?40 μm?的細(xì)胞和組織切片。

3.J其均勻的?1.4 nm?直徑金標(biāo)簽。

4.提供?Fab'、IgG?和鏈霉親和素偶聯(lián)物。

5.接近?1?個?Nanogold??粒子到?1?個?Fab'(或?IgG)。

6.低非特異性親和力產(chǎn)生最小的背景。

7.銀增強(qiáng)的超靈敏性:免疫印跡上抗原檢測量為?0.1 pg。

8.金與遠(yuǎn)離抗原結(jié)合區(qū)域的抗體共價連接。

9.高穩(wěn)定性和長保質(zhì)期:結(jié)合物在儲存一年后反應(yīng)性不變。

10.在廣泛的?pH?值和離子強(qiáng)度范圍內(nèi)穩(wěn)定。

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艾美捷?Nanoprobes?Nanogold偶聯(lián)物的應(yīng)用:

1.新的用于?EM?的蛋白質(zhì)融合標(biāo)簽的金標(biāo)記

2.超薄冷凍切片的?EM,

參見:Takizawa, T.?和?Robinson, JM;J. Histochem Cytochem., 42 , 1615-1623 (1994))。[其他參考]。

3.預(yù)嵌入電子顯微鏡。[參考資料]

4.嵌入后電子顯微鏡(對于嵌入前和嵌入后的方法,

參見:Nusser, Z.?等人:J. Neuroscience, 15 , 2948-2960 (1995))。[其他參考]

5.相關(guān)電子和光/共焦顯微術(shù)(參見:Sun, XJ, et al.: J. Histochem. Cytochem., 43 , 329-35 (1995))。

6.原位雜交檢測。[參考資料]

7.掃描電子顯微鏡(參見:Hermann, R.?等人:Histochem. Cell Biol., 106 , 31-39 (1996))。

案例1:原位雜交應(yīng)用:

Nanogold??探針的小尺寸及其對核抗原的訪問能力,加上銀增強(qiáng)獲得的高靈敏度,使其成為超靈敏的特定?DNA?序列原位雜交檢測的專業(yè)試劑,無論有無原位?PCR。使用生物素化酪胺(催化報告分子沉積或?CARD,也稱為酪胺信號放大或?TSA)放大目標(biāo)信號獲得了驚人的結(jié)果:使用?Nanogold?-鏈霉親和素和銀增強(qiáng)檢測產(chǎn)品,即使在細(xì)胞中也能產(chǎn)生清晰的信號僅具有一個或兩個拷貝的靶基因,在?RNA?檢測中可以看到類似的靈敏度(參見:Zehbe, I.?等人:是。J. Pathol., 150 , 1553-1561 (1997))。

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優(yōu)點(diǎn):

比?NBT-BCIP?堿性磷酸酶或過氧化物酶與標(biāo)記擴(kuò)增結(jié)合用于單基因拷貝分辨率更敏感。

大多數(shù)情況下不需要更冗長的?PCR?程序:避免因錯誤引發(fā)和擴(kuò)增子擴(kuò)散而導(dǎo)致的假陽性。

用標(biāo)準(zhǔn)明場顯微鏡很容易看到黑色。不需要昂貴的熒光光學(xué)元件,也沒有自發(fā)熒光或漂白問題。

黑色信號顏色與全強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞和核染色劑(H & E、核固紅、甲基綠)兼容。

也可用于?EM?研究的高空間分辨率信號。

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案例2:電子顯微鏡:

Nanogold??偶聯(lián)物很容易擴(kuò)散到幾十微米的組織、透化細(xì)胞和細(xì)胞核中,而大多數(shù)膠體金探針很難在這些地方擴(kuò)散。染色更具化學(xué)計量性,背景較低。盡管?1.4 nm Nanogold??顆粒在?50-120 kX?放大倍率下直接可見,即使在?80 nm?切片中(在其他未染色的樣品中),在使用銀顯影劑(LI Silver?或?HQ)進(jìn)行短暫(1-5?分鐘)增強(qiáng)后更容易觀察到銀)。即使用醋酸鈾、鋨或檸檬酸鉛染色,在較低放大倍率下也很容易看到產(chǎn)生的?2?至?100 nm?銀顆粒(大小取決于顯影時間)。

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案例3:光和共聚焦顯微鏡:

Nanogold??探針對透化細(xì)胞和細(xì)胞核具有出色的穿透力,與免疫熒光探針相似,遠(yuǎn)優(yōu)于膠體金探針。Nanogold?-Fab'?探針比免疫熒光?IgG?標(biāo)記小。Nanogold??探針不會發(fā)生聚集,而且由于?Nanogold??與共價生物分子共價連接,因此它們非常穩(wěn)定。隨后短暫(5-15?分鐘)銀增強(qiáng)(LI Silver)即使在普通明場光學(xué)顯微鏡(不需要紫外光學(xué))中也能發(fā)出可見信號,其靈敏度通常優(yōu)于熒光。由于相同的?Nanogold??探針也可用于?EM,因此可以在光學(xué)顯微鏡或共聚焦顯微鏡下進(jìn)行初步染色,同時可以在超微結(jié)構(gòu)?EM?水平上檢查平行樣品。這種靈活性不適用于熒光探針。Nanogold??現(xiàn)在可與鏈霉親和素和抗生物素?Fab'?結(jié)合用于核酸檢測。

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Nanoprobes專注于免疫金標(biāo)記和免疫測定試驗(yàn)領(lǐng)域,為廣大科研機(jī)構(gòu)提供用于檢測生物分子的最靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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