Feulgen DNA倍性分析——Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒
今天來聊聊Feulgen DNA倍性分析。Feulgen反應(yīng)是非常經(jīng)典的顯示DNA的組織化學(xué)反應(yīng),雖然是1924年發(fā)明的,至今這種方法仍是DNA定量測定主要染色方法之一。在病理學(xué)研究上,將組織進行冷凍切片、快速石蠟切片等制片后,運用圖像分析系統(tǒng)及顯微分光光度計對細胞DNA含量進行測定和分析,對判斷病癥的良惡性有重要的參考價值。
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Feulgen染色程序的基礎(chǔ)是使用鹽酸水解,從DNA分子的脫氧核糖骨架上去除嘌呤。新暴露的脫氧核糖具有一個醛基,然后可以通過用Schiff試劑(在這種情況下,甲酚紫和硫酸的水溶液用于測試醛的存在)染色來識別。普通的Feulgen是用Schiff試劑與游離的醛基進行結(jié)合行成紫紅色化合物,只要有DNA就呈現(xiàn)紫紅色。產(chǎn)生的染色顏色數(shù)量與染色核中存在的DNA數(shù)量成正比。我們今天說的Blue Feulgen顯示的結(jié)果確實藍色的。反應(yīng)機理可表示為:2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3
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Cat#DPK500:Blue Feulgen DNA Ploidy Analysis Staining Kit
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Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒是一種組織化學(xué)試劑盒,用于量化細胞中的核DNA含量。該試劑盒可用于各種類型的標本,從細胞離心機制備到福爾馬林固定石蠟包埋組織切片。
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Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒組分:
藍色Feulgen染色液2 x 500ml?;
脫色劑10管
沖洗試劑10瓶
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儲存:染色劑的瓶子可以反復(fù)打開,并應(yīng)在2-8o?C的溫度下保存。在轉(zhuǎn)換為希夫試劑后,染色劑應(yīng)在15分鐘內(nèi)使用。脫色劑和沖洗劑的小瓶為一次性使用而設(shè)計,應(yīng)在2-8oC或18-25oC下保存。
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樣本和試劑準備:該試劑盒針對不同的樣本有不同的制樣方法。
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染色結(jié)果,圖左為細胞染色;圖右為組織染色結(jié)果:
結(jié)果是不是與傳統(tǒng)的紅色結(jié)果是不是大不相同。雖然顏色不一樣,但是原理卻是一樣的。
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Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒特點和優(yōu)勢:
獨特的配方消除了染料沉淀,比傳統(tǒng)的基于Feulgen試劑的試劑盒染色更干凈。該染色試劑盒針對DNA Ploidy標本進行了優(yōu)化,這些標本將被染色,然后在圖像分析系統(tǒng)上進行掃描和查看。
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注意事項:
從這個反應(yīng)機理公式上看2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3,整個反應(yīng)過程時會產(chǎn)生少量的SO2的,所以大家在實驗過程中要做防護措施,戴好口罩,不用在實驗區(qū)域吃東西喝水喝酒喝飲料,也不要抽煙?。∵€有就是不管做什么實驗都要有一個良好的實驗習(xí)慣,做完實驗即使清理廢棄物和擦拭桌面喲!