圖一：PUMC數(shù)據(jù)庫(kù)中HaCaT的圖片

HaCat人永生化表皮細(xì)胞，該細(xì)胞源自一位 62 歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，廣泛用于皮膚生物學(xué)和分化研究。在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基和胎牛血清的高鈣含量培養(yǎng)條件下，HaCaT細(xì)胞具有部分至完全分化的表型。

HaCat細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，顯微鏡下呈典型上皮細(xì)胞樣，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白表達(dá)呈陽(yáng)性。

▲?本文為大家介紹HaCat細(xì)胞的培養(yǎng)條件及注意事項(xiàng)。

【細(xì)胞特性】

①? 細(xì)胞難消化，需要消化10分鐘左右。

②? 細(xì)胞有聚團(tuán)堆疊生長(zhǎng)的特性，注意細(xì)胞接種要均勻，及時(shí)傳代。

【細(xì)胞培養(yǎng)條件】

MEM（GIBCO CAT:11095,或同配方）+10%胎牛血清（南美進(jìn)口級(jí)別）+ 1X 非必需氨基酸（CELLCOOK CAT:CM1008S/L）

【傳代比例】

1:3傳代（培養(yǎng)面積比）

【傳代方式】

消化8-10分鐘

【換液頻率】

2~3天換液1次

【凍存液配方】

MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO

【培養(yǎng)要點(diǎn)】

細(xì)胞特別難消化，需要消化10分鐘左右，且在正常培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)有大量分泌物生成，所以在消化前一定要用不含鈣鎂離子的PBS潤(rùn)洗2-3次，消化過(guò)程中放入培養(yǎng)箱中消化，可提高消化效率

【培養(yǎng)等級(jí)】

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參考文獻(xiàn)

01此文獻(xiàn)HaCaT細(xì)胞購(gòu)自賽庫(kù)生物

[1]Zhou Y ,? Huang Z ,? Su J , et al. Benserazide is a novel inhibitor targeting PKM2 for melanoma treatment[J]. International Journal of Cancer, 2020.?

DOI：10.1002/ijc.32756

02

此文獻(xiàn)HaCaT細(xì)胞購(gòu)自賽庫(kù)生物

[2]Yinghui, Wang, Xuyi, et al. miR-27a Downregulation Promotes Cutaneous Squamous Cell Carcinoma Progression via Targeting EGFR.[J]. Frontiers in oncology, 2019, 9:1565-1565.?

DOI：10.3389/fonc.2019.01565