活性氧?(Reactive Oxygen Species, ROS)?是細胞代謝過程中產(chǎn)生的一系列含氧物質(zhì)，包括超氧化物、過氧化氫、羥自由基以及具有高氧化活性的活性氧代謝產(chǎn)物，參與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程。其中，細胞內(nèi)活性氧的升高是細胞凋亡的標志之一?；钚匝踔饕芍行粤＜毎⒕奘杉毎?、單核細胞為代表的免疫細胞受到刺激后產(chǎn)生，其它體細胞在應激條件下線粒體電子傳遞異常也會產(chǎn)生活性氧。免疫細胞產(chǎn)生的活性氧能夠抵御微生物的感染。在病理條件下，過度產(chǎn)生的活性氧也會導致機體損傷和引發(fā)各種疾病。活性氧(ROS)參與許多退行性神經(jīng)系統(tǒng)病癥，如阿茲海默癥、帕金森癥、萎縮性脊髓側(cè)索硬化以及年老或外傷導致的腦功能紊亂等。此外活性氧是植物體內(nèi)正常代謝的信號小分子，在植物的生長發(fā)育和抗逆反應中具有重要作用。

接下來咱們一起看看有關(guān)體外活性氧/活性氮檢測的相關(guān)研究吧！

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艾美捷體外活性氧/活性氮檢測試劑盒是一種用于測量總自由基含量的檢測試劑盒一個樣本。該分析使用專有的淬滅熒光探針，二氯二氫熒光素DiOxyQ（DCFH-DiOxyQ），是一種特定的ROS/RNS探針，基于與流行的2'，7'-二氯二氫熒光素二乙酸酯。DCFH DiOxyQ探頭首先用

然后以高反應性DCFH形式穩(wěn)定反應狀態(tài)下，ROS和RNS物質(zhì)可以與DCFH反應，DCFH被迅速氧化成熒光2'，7'-二氯二氫熒光素（DCF）。熒光強度成比例與樣品內(nèi)的總ROS/RNS水平相關(guān)。DCFH DiOxyQ探針可與氫氣反應過氧化物（H2O2）、過氧自由基（ROO）、一氧化氮（NO）和過氧亞硝酸根陰離子（ONO-).?這些自由基分子是ROS和RNS的代表，因此允許測量樣本中的總自由基群體。

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艾美捷體外活性氧/活性氮檢測試劑盒也可以用于評估抗氧化劑對自由基的影響。該試劑盒的檢測靈敏度極限為10pMDCF和H2O2分別為40nM。每個試劑盒提供足夠的試劑，最多可進行96次分析，包括標準曲線和未知樣品。

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艾美捷體外活性氧/活性氮檢測試劑盒組分：

1.底漆試劑（234701）：一管250μL溶液。

2.穩(wěn)定溶液（10X）（234702）：一管1.5 mL溶液。

3.催化劑（250X）（234703）：一管20μL溶液。

4.DCF DiOxyQ（234704）：一個50μL琥珀色甲醇溶液管。

5.DCF標準品（234202）：一個100μL琥珀色管，含有1mM DMSO溶液。

6.過氧化氫（234102）：一個100μL琥珀色管，裝有8.821M溶液。

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檢測原理：

該試劑盒是一種用于測量游離ROS/RNS總量的體外測定試劑盒自由基活性。用催化劑將未知的ROS或RNS樣品或標準加入到井中這有助于加速氧化反應。短暫孵育后，制備的DCFH探針添加到所有孔中，并允許氧化反應進行。測量樣品對過氧化氫或DCF標準進行熒光測定。在96孔中進行測定可以在標準熒光板讀取器上讀取的熒光板格式。自由基通過與預定的DCF或氫進行比較來確定未知樣品中的含量過氧化物標準曲線。

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相關(guān)研究：

1.STA-330：OxiSelect? TBARS測定試劑盒（MDA定量）

2.STA-340：OxiSelect??超氧化物歧化酶活性測定

3.STA-341：OxiSelect??過氧化氫酶活性測定試劑盒

4.STA-342：OxiSelect??細胞內(nèi)ROS測定試劑盒（綠色熒光）

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相關(guān)文獻：

1.Bass DA，Parce JW，Dechatelet LR，Szejda P，Seeds MC，Thomas M.流式細胞術(shù)研究

中性粒細胞氧化產(chǎn)物的形成：對膜刺激的分級反應。J免疫；

2.Brandt R，Keston AS。二乙酰二氯熒光素的合成；

3.Keston AS，Brandt R.超微量過氧化氫的熒光分析。