產(chǎn)品特點

Fluo-3, AM 是最常用的檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。

它穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)，F(xiàn)luo-3 若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但是當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光，最大激發(fā)波長為506nm，最大發(fā)射波長為526nm。

實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm 左右，發(fā)射波長為525～530nm。

可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

產(chǎn)品簡介

中文名稱：鈣離子熒光探針

英文名稱：Fluo-3AM(solutioninacetonitrile)

CAS：121714-22-5

分子式：C51H50Cl2N2O23

分子量：1129.85

性狀：紅色粉末

供應(yīng)商信息：陜西新研博美生物科技有限公司是國內(nèi)領(lǐng)先的生物試劑供應(yīng)商，提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、近紅外熒光染料、活性熒光染料、熒光標(biāo)記的葡聚糖BSA等等試劑產(chǎn)品，可以滿足從毫克級到公斤級的定制需求，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷海內(nèi)外多個國家和地區(qū)，可以滿足不同客戶的定制需求。

操作說明（for Human T cells）

1.試劑?

2 mM 的Fluo-3, AM/DMSO（將1mg Fluo-3, AM 溶于442μL DMSO）；Pluronic F127；Hanks?balanced salt solution（HBSS）； HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）

2.操作

①. 向Fluo-3, AM/DMSO 溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127 可以防止Fluo-3,AM 在HBSS 中聚合并能幫助其進(jìn)入細(xì)胞。

②. 用HBSS 稀釋Fluo-3, AM 溶液，制備4μM 的Fluo-3, AM 工作液。

③. 將Fluo-3, AM 工作液加入細(xì)胞，在37℃培養(yǎng)20 分鐘。

④. 加入5 倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40 分鐘。

⑤. 用HEPES buffer saline 洗滌細(xì)胞3 次，然后用HEPES buffer saline 使細(xì)胞重懸浮，制成1×105 cells/mL 的溶液。

⑥. 37℃下培養(yǎng)10 分鐘，然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光鈣離子檢測。激發(fā)波長506nm，發(fā)射波長526nm。

標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，在每次實驗前，請先確定最佳條件。以上方法僅供參考。

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