大豆作為優(yōu)質(zhì)的植物蛋白，成為了人和動物必須的氨基酸來源，但是大豆中也還有許多對人體有害的物質(zhì)，比如大豆抗?fàn)I養(yǎng)因子，大豆抗?fàn)I養(yǎng)因子包含大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、大豆凝集素、大豆胰蛋白酶抑制因子、單寧、尿酸等，今天我們主要來講講大豆抗?fàn)I養(yǎng)因子中的大豆胰蛋白酶抑制因子

大豆胰蛋白酶抑制劑(soybean trypsin inhibi-tor,STI)是一種多肽類或蛋白質(zhì)。它對植物本身具有保護作用，主要存在于大豆的子葉中，可防止大豆籽粒自身發(fā)生分解代謝，使種子處于休眠狀態(tài)，能調(diào)節(jié)大豆蛋白的合成與分解，并具有抗蟲作用。然而大豆胰蛋白酶抑制劑具有抗?fàn)I養(yǎng)作用，主要表現(xiàn)在抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性、降低蛋白質(zhì)消化吸收和造成胰腺腫大。此外，它還具有一定的致敏性。首次報道有呼吸紊亂的大豆過敏患者血清中含有大豆胰蛋白酶抑制劑的特異性IgE抗體。

蛋白質(zhì)類蛋白酶抑制因子按其結(jié)構(gòu)組成分為：Kunitz胰蛋白酶抑制因子(Kunitz trypisin inhibitor,KTI，或者庫尼茨胰蛋白酶抑制因子)和Bowan-Birk蛋白酶抑制因子（Bowman-Birk inhibitor、BBI、或稱為鮑曼·伯克胰蛋白酶抑制因子），約占大豆種子蛋白質(zhì)干重的2%，在生大豆中的含量約為3%。KTI含量居多，生大豆抗?fàn)I養(yǎng)作用的40%來自于KTI。因此，KTI含量的高低在很大程度上決定了大豆所具有的抗?fàn)I養(yǎng)作用的強弱。胰蛋白酶抑制因子檢測（KTI）技術(shù)起著至關(guān)重要的作用。

大豆胰蛋白酶抑制因子檢測

大豆胰蛋白酶抑制因子主要檢測，豆粕、發(fā)酵豆粕，主要是用于動物營養(yǎng)研發(fā)中的發(fā)酵豆粕工藝優(yōu)化，研發(fā)出最為優(yōu)質(zhì)的發(fā)酵工藝，去除豆粕中的大多數(shù)的大豆胰蛋白酶抑制因子。

大豆胰蛋白酶抑制因子檢測方法

大豆胰蛋白酶抑制因子檢測目前主要使用ELISA酶聯(lián)免疫檢測法，使用大豆胰蛋白酶抑制因子檢測試劑盒
1. 提?。悍Q取樣本 0.30g 加 30mL1×樣本提取工作液，25℃提取 16h
2. 稀釋：4000rpm 離心 5min，用樣本稀釋液稀釋 30 倍，混勻待檢
3. 加樣：加入校準(zhǔn)品/待測樣本 50?L，抗體工作液 50?L，37℃孵育 10min
4. 洗板：用 1×洗滌工作液洗板 4 次，拍干
5. 加酶：加入酶標(biāo)試劑 100?L/孔，37℃孵育 10min
6. 洗板：用 1×洗滌工作液洗板 4 次，拍干
7. 顯色：加入顯色液 100?L/孔，37℃孵育 10min
8. 終止：加終止液 100?L/孔，酶標(biāo)儀讀數(shù)
9. 計算：數(shù)據(jù)帶入計算軟件

大豆胰蛋白酶抑制因子檢測試劑盒組成

30×濃縮樣本提取液：50mL
大豆胰蛋白酶抑制因子樣本稀釋液：100mL
20×濃縮洗液：50mL
大豆胰蛋白酶抑制因子檢測板：96T
大豆胰蛋白酶抑制因子校準(zhǔn)品（1～5）：各 1.5mL
大豆胰蛋白酶抑制因子抗體工作液：8mL
大豆胰蛋白酶抑制因子酶標(biāo)試劑：14mL 顯色液：14mL
終止液：14mL 蓋板膜 3 張、質(zhì)檢報告 1 份、說明書 1 份