艾美捷逆轉(zhuǎn)錄病毒定量試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備&結(jié)果示例
Cell Biolabs艾美捷QuickTiter??逆轉(zhuǎn)錄病毒定量試劑盒不涉及細(xì)胞感染;相反,它專門(mén)測(cè)量純化病毒或未純化病毒的病毒核酸含量上清液樣品。對(duì)于未純化的病毒上清液,試劑盒為特別適用于在轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟之前測(cè)定上清液效價(jià)。該套件具有檢測(cè)靈敏度極限為1.5 X 109病毒顆粒(VP)/mL,足以用于中等或高滴度逆轉(zhuǎn)錄病毒樣品。整個(gè)過(guò)程大約需要60分鐘。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)20次測(cè)試??焖俚味▋x??逆轉(zhuǎn)錄病毒定量試劑盒為快速定量病毒上清液和純化病毒的逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度。
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Cell Biolabs艾美捷逆轉(zhuǎn)錄病毒定量試劑盒基本參數(shù):
中文名稱:QuickTiter?逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度檢測(cè)試劑盒
英文名字:QuickTiter Retrovirus Quantitation Kit
編號(hào):VPK-120
規(guī)格:20assays
保存建議:4oC
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標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:
1.從200μg/mL,100μg/mL,50μg/mL,25μg/mL,…0創(chuàng)建逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA標(biāo)準(zhǔn)品
μg/mL(1:2連續(xù)稀釋),標(biāo)記九個(gè)微量離心管1~9。
2.加入20μL1X QuickTiter? 溶液C至#2至#9管,轉(zhuǎn)移20μL200μg/mL?QuickTiter? 逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA標(biāo)準(zhǔn)品到#1和#2管。將#2管混合,轉(zhuǎn)移20μL?混合物(100μg/mL)到下一個(gè)試管中。重復(fù)通過(guò)tube#8的步驟,并使用tube#9作為空白。
3.將5μL每種稀釋液(包括空白)轉(zhuǎn)移至適用于熒光計(jì)的微量滴定板。添加向每個(gè)包含5μL樣品的孔中加入95μL 1XCyQuant?GR染料。讀盤(pán)子使用480/520 nm濾光片組的熒光讀板器。
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Cell Biolabs艾美捷逆轉(zhuǎn)錄病毒定量試劑盒結(jié)果示例:
下圖顯示了典型的定量結(jié)果。應(yīng)該使用下面的數(shù)據(jù)僅限參考。這些數(shù)據(jù)不應(yīng)該用來(lái)解釋實(shí)際結(jié)果。

圖:逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA標(biāo)準(zhǔn)曲線。QuickTiter? 逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA標(biāo)準(zhǔn)品為按照上述說(shuō)明進(jìn)行稀釋。熒光測(cè)量是在SpectraMax Gemini XS熒光計(jì)(分子器件),具有485/538 nm濾光片組和530 nm截止。