【菜鳥(niǎo)博士】waters UPLC HPLC使用教程之十三、校正曲線

十三、校正曲線

處理校正標(biāo)準(zhǔn)樣時(shí)，軟件會(huì)為處理方法的“組分”表中列出的每個(gè)組分生成校正曲線。因此，在對(duì)未知樣進(jìn)行定量前需要進(jìn)行外標(biāo)校正曲線的繪制。

1、新建外標(biāo)校正曲線

外標(biāo)校正曲線的建立步驟為：

1、在如下圖1所示的項(xiàng)目界面，在通道內(nèi)選擇需要處理的標(biāo)準(zhǔn)樣數(shù)據(jù)（一般是最低濃度或含量標(biāo)樣），雙擊后進(jìn)入到“查看-主窗口”界面，如圖2所示。

圖 1

2、在“查看-主窗口”界面按照“9、處理方法”的步驟新建處理方法，保存處理方法名稱（例如Sam_ESTD），如圖3所示。

圖 2

圖 3

3、在如下圖4所示的項(xiàng)目界面，在通道內(nèi)選擇需要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊右鍵選擇“改變樣品”，彈出“修改樣品”窗口。注：在Empower進(jìn)行處理時(shí)，只有標(biāo)樣能夠生成校正曲線，然后才能對(duì)未知樣進(jìn)行定量計(jì)算。如果在進(jìn)樣時(shí)沒(méi)有正確設(shè)置樣品類型，可在此窗口直接進(jìn)行修改（如圖5中紅框內(nèi)）。也可針對(duì)具體情況，修改樣品名稱、樣品重量以及稀釋倍數(shù)。

圖 4

圖 5

4、在如下圖6所示的“修改樣品”窗口點(diǎn)擊菜單欄中的“編輯”并選擇“含量”進(jìn)入到“組分編輯器”界面，如圖7所示。注：“組分編輯器”界面選擇“全部樣品”表單。

圖 6

5、在 “組分編輯器”窗口點(diǎn)擊菜單欄中的“編輯”并選擇“從處理方法復(fù)制組分”即彈出“打開(kāi)現(xiàn)有的處理方法”界面，如圖8所示。選擇已有的處理方法并打開(kāi)則在組分編輯器中顯示處理方法中的組分，如圖9所示。

圖 7

圖 8

6、在 “組分編輯器”界面中，在“全部樣品”表單中，針對(duì)對(duì)照品的每一組分，填寫“數(shù)值”，必要時(shí)填寫“單位”后，確定后關(guān)閉組分編輯器。注：在填寫“值（標(biāo)準(zhǔn)樣）”列下標(biāo)準(zhǔn)樣組份的含量時(shí)，將“組份編輯器”界面與“修改樣品”界面相比較，在“值（標(biāo)準(zhǔn)樣）”下光標(biāo)所在列的含量即為“修改樣品”界面中顯黑的標(biāo)準(zhǔn)樣品的含量。

圖 9

6、在下圖10中的“修改樣品”界面中點(diǎn)擊菜單欄中的“文件”并點(diǎn)擊保存后退出“修改樣品”窗口。

圖 10

2、定量計(jì)算

經(jīng)過(guò)上一節(jié)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行處理后即可進(jìn)行對(duì)未知樣的定量等。對(duì)未知樣的定量的步驟為：

1、在如下圖11所示的項(xiàng)目通道界面依次選中要處理的全部樣品（注意先選擇標(biāo)樣，再選擇未知樣），右鍵鼠標(biāo)在彈出的菜單中選擇“處理”，即彈出“后臺(tái)處理和報(bào)告”窗口如圖12所示。

圖 11

2、在“后臺(tái)處理和報(bào)告”窗口勾選“處理”及 “使用指定的處理方法”并選擇已建立的處理方法（如Sam_ESTD），可勾選“清除校正”。點(diǎn)擊確定后即對(duì)已選擇數(shù)據(jù)進(jìn)行校正并定量。

圖 12

3、在如下圖13所示的項(xiàng)目結(jié)果界面可查看經(jīng)過(guò)校正定量過(guò)的未知樣結(jié)果及處理過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)樣。雙擊未知樣結(jié)果即打開(kāi)其“查看-主窗口”，如圖14所示。在結(jié)果表中可以查看未知樣的定量結(jié)果。

圖 13

圖 14

4、從“查看-主窗口”進(jìn)入到“校準(zhǔn)曲線窗口”可查看由標(biāo)準(zhǔn)樣經(jīng)處理后所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)信息，如線性方程及相關(guān)系數(shù)等，如圖15所示。

圖 15

5、在“校準(zhǔn)曲線窗口”中也可改變組份來(lái)查看不同峰或組份的后所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)信息，如圖16所示。

圖 16

發(fā)布于 2022-05-12 16:30