酪胺擴(kuò)增，有時(shí)也稱為催化報(bào)告基因沉積?(CARD)，是一種酶介導(dǎo)的檢測(cè)方法，它利用辣根過氧化物酶?(HRP)?的催化活性原位產(chǎn)生靶蛋白或核酸序列的高密度標(biāo)記。據(jù)報(bào)道，與傳統(tǒng)的親和素-生物素檢測(cè)相比，酪胺擴(kuò)增方法的靈敏度提高了?100?倍?？蛇M(jìn)行多輪酪胺信號(hào)放大，進(jìn)行多重檢測(cè)。

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TSA試劑盒提供了用于小鼠二次檢測(cè)的所有關(guān)鍵試劑，兔或生物素化的初級(jí)抗體，然后在細(xì)胞中擴(kuò)增酪胺信號(hào)或組織切片。HRP二級(jí)試劑介導(dǎo)標(biāo)記的酪氨酸酰胺在反應(yīng)位點(diǎn)附近轉(zhuǎn)化為含有酪氨酸的蛋白質(zhì)。這允許用大量染料或生物素分子標(biāo)記的靶蛋白，產(chǎn)生與使用染料標(biāo)記的第二抗體相比具有更強(qiáng)的熒光信號(hào)。

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因此，TSA試劑盒提供了高靈敏度和信號(hào)背景比的優(yōu)勢(shì)，使低豐度靶標(biāo)的可視化成為可能使用傳統(tǒng)的免疫染色方法進(jìn)行有效標(biāo)記。

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Tyramide擴(kuò)增可以與染料標(biāo)記的抗體或其他抗體組合使用用于多色成像的染色方法。兩個(gè)或多個(gè)酪酰胺反應(yīng)也可以是按順序執(zhí)行，以便在一個(gè)樣品上標(biāo)記不同的目標(biāo)。

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這些試劑盒可與Biotin XX Tyramide或Biotium的下一代CF?染料一起使用Tyramides與我們的高性能山羊抗小鼠、山羊抗兔，或鏈親和素-HRP綴合物。CF?染料提供卓越的亮度和光穩(wěn)定性與其他熒光染料相比。

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艾美捷TSA試劑盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A#BTM-33000組件：

CF??染料或生物素-酪胺原液

HRP?山羊抗小鼠?IgG(高度交叉吸附)

BSA?用于阻塞

Tyramide Amplification Buffer Plus *

30%?過氧化氫*

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TSA試劑盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A特征：

將靈敏度提高多達(dá)?100?倍

使用較低的一抗?jié)舛?/p>

增強(qiáng)挑戰(zhàn)性樣品中的信號(hào)，例如人類?FFPE?組織

從?6?種明亮且耐光的?CF??染料或生物素中選擇

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該試劑盒包含使用山羊抗小鼠?HRP?二抗和熒光?CF??染料或生物素進(jìn)行酪胺信號(hào)放大?(TSA)?以增加免疫熒光信號(hào)的試劑。

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試劑制備：

1.如果使用甲醛固定，則在PBS中制備3.75%的甲醛溶液在冰上預(yù)冷。如果目標(biāo)蛋白質(zhì)或結(jié)構(gòu)能夠受到甲醇（如肌動(dòng)蛋白、核仁素）的干擾。

2.如果使用甲醛固定，則制備滲透緩沖液：0.5%Triton?X-100在PBS中。

3.通過將1g BSA溶解在100mL含有0.5%的PBS中來制備封閉緩沖液Triton?X-100。我們建議立即使用阻塞緩沖區(qū)。未使用的阻塞緩沖液可以等分，并在-20°C下儲(chǔ)存。

4.將100uL的PBS加入到HRP山羊抗兔IgG、HRP山羊抗體小鼠IgG中，或HRP-鏈親和素，并渦旋以溶解所有固體，制成1mg/mL的原液解決方案未使用的儲(chǔ)備溶液可以在4°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月。請(qǐng)勿添加疊氮化鈉（NaN3)解決方案。

5.僅適用于鏈親和素或生物素XX酪酰胺試劑盒：制備生物素封閉洗滌緩沖液：1%BSA和0.05%TWEEN?20在PBS中的溶液。

6.僅適用于鏈親和素或生物素XX酪胺試劑盒：制備未標(biāo)記的鏈親和素溶液：0.1mg/mL鏈霉親和素在生物素封閉洗滌緩沖液中（在步驟5中制備）。

7.僅適用于鏈親和素或生物素XX酪胺試劑盒：制備生物素溶液：0.5 mg/mL生物素封閉洗滌緩沖液中的生物素（在步驟5中制備）。