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組培實驗室所需儀器設(shè)備-上海農(nóng)卉組培

2022-12-24 21:48 作者:上海農(nóng)卉組培  | 我要投稿

  什么是組培室?組培室也稱人工氣候室,是一個人為可以控制的小型環(huán)境室,它可以滿足各種實驗的需要。不知大家是否知道,進行植物生長研究的主要目的就是為了能夠提高植物的產(chǎn)能,獲得更多的經(jīng)濟效益。在以往的植物生長研究中,因為受技術(shù)條件的限制,實驗過程基本上都是在自然環(huán)境下進行的,但是因為自然環(huán)境的不可控性,使得植物生長研究實驗受到嚴重的阻礙,實驗人員得不到準確的實驗數(shù)據(jù)。而組培室的研發(fā)及使用,無疑又是生物界的一次變革,滿足了植物栽培以及種子發(fā)芽試驗的需求。

  

  1.凈工作臺

  

  目前絕大部分細胞實驗室使用凈工作臺實現(xiàn)無菌操作,具有操作簡單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。安徽人和凈化為您介紹兩種主要凈工作臺-側(cè)流式(垂直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經(jīng)空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。

  

  (1)側(cè)流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上 流向?qū)?cè),形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌,工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式;

  

  (2)外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動,因而外方氣流不致混入操作,工作臺結(jié)構(gòu)為開放式,但進行有害物質(zhì)實驗操作對操作者不利。凈工作臺應(yīng)需要定期請有關(guān)部門檢查潔凈度,符合要求的凈工作臺其潔凈度應(yīng)達到100級,用塵埃粒子計數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)過3.5個/L;空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s;細菌菌落數(shù)平均<1個,根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器。

  

  

  2.顯微鏡

  

  倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)設(shè)備,主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有沒有污染發(fā)生。如資金允許,建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等,可隨時拍攝并記錄細胞生長情況。

  

  

  3.培養(yǎng)箱

  

  體外培養(yǎng)的細胞和體內(nèi)細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,一般適生長溫度為37℃,溫差變化不應(yīng)過±0.5℃。溫度升高2℃時,變不利于細胞生存,溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此,可控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是好的選擇。

  

  (1)恒溫培養(yǎng)箱:應(yīng)選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱,此類培養(yǎng)箱靈敏度高,溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜,其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng)。

  

  (2)CO2培養(yǎng)箱:目前多數(shù)的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2(常用濃度為百分之5),易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH,適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時,為使培養(yǎng)瓶內(nèi)與外界保持通氣狀態(tài),可將瓶蓋略微旋松,為避免細胞被污染,使用這種培養(yǎng)方式時,培養(yǎng)箱內(nèi)空氣須保持清潔,需定期用紫外線照射或酒精消毒,同時培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置盛有無菌蒸餾水的水槽,防止培養(yǎng)液蒸發(fā),保持箱內(nèi)相對濕度在百分之100。

 

 

  (3)細胞培養(yǎng)耗材:培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶。

  

  4.烘箱(干燥箱)

  

  用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內(nèi)溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應(yīng)鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。

  

  5.水純化裝置

  

  細胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,細胞培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細胞培養(yǎng)器皿用水都須事先經(jīng)過嚴格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合,可使普通水純化為純水和純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式、臺式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類實驗用水要求選擇配置殺菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的濾型純水裝置。

  

  6.冰箱

  

  細胞培養(yǎng)實驗室的設(shè)備,應(yīng)專用,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質(zhì),且應(yīng)保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和低溫冰箱。

  

  普通冰箱:儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,可短期保存組織樣本。

  

  -20℃低溫冰箱、低溫冰箱:用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑,如酶、血清等。

  

  7.細胞冷凍儲存器

  

  儲存器常用的液氮容器,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時需要考慮三個因素:容積大小、取放使用方便、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲存1ml的凍存管250-15000個左右。液氮溫度低溫可達-196℃,使用時應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),需注意觀察剩余液氮量,及時補充,避免液氮不足使細胞受損或死亡。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇,可配置有電子控制器的液氮儲存器,實現(xiàn)凍存自動化;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點;可配置報警系統(tǒng),設(shè)置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報警;同時具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐,從而更有效地保護樣品,防止容器內(nèi)升溫。另外,可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲存罐補充液氮,保證樣品安全。

  

  8.離心機

  

  細胞培養(yǎng)時,通常使用離心機制備細胞懸液、調(diào)整細胞密度、洗滌和收集細胞。一般常規(guī)配置4000rpm臺式離心機;若要做細胞沉降,需要使用80-100G離心力,因為離心力過大會損傷細胞。根據(jù)不同要求,有大容量、可調(diào)溫度離心機、高速離心機和低溫冷凍離心機等更多功能離心機可選擇。

  

  9.天平

  

  常用的有精 密天平和分析天平。分析天平的精 確度一般為0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根據(jù)取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大于100mg宜選用準 確度0.1mg的天平;取樣量100-10mg,選用準確度0.01mg的天平;取樣量10mg宜選用準確度0.001mg的天平。天平需要定期校準,可選擇有自動校準功能的天平,方便維護。天平使用需要注意清潔,避免腐蝕性粉末、液體直接接觸稱量臺。


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