周春燕生物化學(xué)與分子生物學(xué)第9版考研真題精選！

資料摘錄：

假如你從某一動(dòng)物組織提取一份總RNA樣品，可采用一些什么方法檢測它的質(zhì)量（完整性）、純度和濃度？并說明判斷的依據(jù)。[中山大學(xué)2009研]

【答案】

（1）對(duì)RNA樣品進(jìn)行質(zhì)量、純度和濃度的檢測

①RNA樣品的質(zhì)量（完整性）和純度檢測

可通過瓊脂糖變性電泳分析檢測。常見的變性電泳有甲醛變性電泳，戊二醛變性電泳等。

②RNA樣品的濃度檢測

可通過紫外分光光度計(jì)確定，選260nm、230nm、280nm和310nm波長讀數(shù)。其中260nm讀數(shù)用來估算樣品中核酸濃度，310nm為背景吸收值。OD26/OD280的比值用于估計(jì)核酸的純度，OD260/OD230估計(jì)去鹽的程度。

（2）判斷依據(jù)

①完整的RNA的甲醛電泳可明顯地觀察到28S和18S兩條帶，并且28S大約是18S的兩倍寬。若兩條帶不明顯，則說明RNA部分降解，可能的原因是污染了RNase或操作劇烈。

②對(duì)于RNA純制品，其可能是蛋白污染所致，可以增加酚抽提；說明去鹽不充分，可以再次沉淀和70%乙醇洗滌。

試從脂類代謝紊亂的角度分析酮尿癥和動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病原因。[華南理工大學(xué)2018研]

【答案】

（1）從脂類代謝紊亂的角度分析酮尿癥的發(fā)病原因?yàn)椋涸谔悄虿』蛱枪┙o障礙等病理狀態(tài)下，胰島素分泌減少或作用低下而胰高血糖素、腎上腺素等分泌上升，導(dǎo)致脂肪動(dòng)員能力增強(qiáng)，脂肪酸在肝內(nèi)的分解增多，酮體的生成也增多，同時(shí)，由于主要來源于糖代謝的丙酮酸減少，使草酰乙酸也減少，導(dǎo)致了乙酰CoA的堆積，此時(shí)肝外組織的酮體氧化作用減少，使肝及血液中累積較多的酮體，形成酮尿癥。

（2）從脂類代謝紊亂的角度分析動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病原因?yàn)椋旱兔芏戎鞍祝↙DL）膽固醇會(huì)與其他物質(zhì)一起形成脂斑。這種堅(jiān)硬厚實(shí)的沉積物可能使動(dòng)脈血管變窄，柔韌性降低，稱為動(dòng)脈粥樣硬化。高密度脂蛋白（HDL）的作用在于清除細(xì)胞膜上過量的膽固醇，其含量降低從另一方面不能夠有效降低膽固醇在血管中的沉積，從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。

舉例說明酶活性調(diào)控的方式。[電子科技大學(xué)2010研]

【答案】

酶活性調(diào)控的方式主要包括：

（1）共價(jià)修飾調(diào)節(jié)。

共價(jià)調(diào)節(jié)是指酶蛋白肽鏈上某些殘基在不同催化單向反應(yīng)的酶的催化下發(fā)生可逆的共價(jià)修飾，從而引起酶活性的改變的過程。例如激酶的磷酸化，信號(hào)激酶能作用于很多靶分子，通過磷酸化作用信號(hào)能被極大地放大。

（2）別構(gòu)調(diào)節(jié)。

別構(gòu)調(diào)節(jié)是指酶分子的非催化部位與某些化合物可逆地非共價(jià)結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象的改變，從而改變酶活性狀態(tài)的方式。例如天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶在催化反應(yīng)中，一分子天冬氨酸結(jié)合到一個(gè)活性部位后，會(huì)增加其他亞基對(duì)底物的親和性，增大反應(yīng)速度。

（3）酶原和酶原激活。

某些酶在細(xì)胞內(nèi)合成或初分泌時(shí)沒有活性，稱為酶原；使酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚悦傅淖饔梅Q為酶原激活。例如胰蛋白酶原為胰蛋白酶的前體，在胰臟中合成，分泌到十二指腸中，通過腸激酶的作用，在6位賴氨酸和7位異亮氨酸之間切斷，變?yōu)橛谢钚缘囊鹊鞍酌浮?/p>

簡述什么是DNA的半保留復(fù)制和DNA的半不連續(xù)復(fù)制。[廈門大學(xué)2009研；武漢科技大學(xué)2014研]

【答案】

（1）DNA半保留復(fù)制

DNA半保留復(fù)制是指DNA在復(fù)制的時(shí)候鏈間氫鍵斷裂，雙鍵解旋分開，每條鏈作為模板在其上合成互補(bǔ)鏈，經(jīng)一系列酶的作用生成兩個(gè)新的DNA分子，子代DNA分子其中一條鏈來自親代DNA；另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻膹?fù)制方式。復(fù)制特點(diǎn)如下：

①復(fù)制過程需要能量供應(yīng)以解開雙螺旋鏈，邊解旋邊復(fù)制；

②已經(jīng)解開的單鏈也可能產(chǎn)生鏈內(nèi)堿基配對(duì)；

③一種酶只能催化有限的物理化學(xué)反應(yīng)。

（2）DNA半不連續(xù)復(fù)制

DNA半不連續(xù)復(fù)制是指DNA復(fù)制時(shí)，前導(dǎo)鏈上DNA的合成是連續(xù)的，后隨鏈上是不連續(xù)的。復(fù)制特點(diǎn)如下：

①前導(dǎo)鏈復(fù)制叉由5'→3'方向連續(xù)復(fù)制；另一條鏈復(fù)制叉由3'→5移動(dòng)，DNA復(fù)制方向不變，形成許多不連續(xù)的岡崎片段，最后連接成完整的DNA，即滯后鏈；

②引物合成酶由5'→3方向合成10個(gè)核苷酸以內(nèi)的RNA引物，聚合酶Ⅲ在引物3-羥基上合成DNA，由聚合酶I切除引物，填補(bǔ)空白，最后DNA連接酶將岡崎片段連接起來，形成完整DNA；

③復(fù)制具有高度忠實(shí)性，其錯(cuò)配幾率約為10-10，從熱力學(xué)上考慮，堿基發(fā)生錯(cuò)配的幾率約為102，酶對(duì)底物的選擇作用和校正作用各使錯(cuò)配幾率下降10-2，所以體外合成DNA的錯(cuò)配幾率為10-6。體內(nèi)復(fù)制叉的復(fù)雜結(jié)構(gòu)提高了復(fù)制的準(zhǔn)確性，修復(fù)系統(tǒng)對(duì)錯(cuò)配加以糾正，進(jìn)一步提高了復(fù)制的忠實(shí)性。

原核生物DNA聚合酶I不同于聚合酶Ⅲ的酶活性是什么？[中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)2005研]

【答案】

原核生物DNA聚合酶I不同于聚合酶Ⅲ的酶活性如下：

（1）DNA聚合酶I的生物學(xué)活性低；而DNA聚合酶Ⅲ的生物學(xué)活性較高，為DNA聚合酶I的15倍。

（2）DNA聚合酶I的N端具有5'→3核酸外切酶功能，可作用于雙鏈DNA，又可水解5末端核苷酸處的磷酸二酯鍵；而DNA聚合酶Ⅲ沒有該功能。

（3）DNA聚合酶I的C端同時(shí)具有DNA聚合酶活性和3'一4'核酸外切酶活性，既可合成DNA鏈，又能降解DNA，從而保證了DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性；而DNA聚合酶Ⅲ主要負(fù)責(zé)DNA復(fù)制中鏈的延長反應(yīng)。

簡述乳糖操縱子正調(diào)控的作用機(jī)制。[中國科學(xué)院大學(xué)2013研]

【答案】

乳糖操縱子（lac操縱子）的正調(diào)控即cAMP-CRP的調(diào)節(jié)，作用機(jī)制如下：

（1）cAMP在腺苷酸環(huán)化酶的作用下由ATP轉(zhuǎn)變而來。

（2）在大腸桿菌中，cAMP的濃度受到葡萄糖代謝的調(diào)節(jié)，細(xì)菌在缺乏碳源或只有甘油或乳糖等不進(jìn)行糖酵解途徑的碳源中，細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度高；在含葡萄糖的環(huán)境中，cAMP的濃度低。

（3）在lac操縱子啟動(dòng)子上游有CAP結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時(shí)，CAMP濃度升高，與CRP結(jié)合，使CRP發(fā)生變構(gòu)，形成cAMP-CRP復(fù)合物，CAMP-CRP復(fù)合物結(jié)合于lac操縱子啟動(dòng)序列中的CAP位點(diǎn)，幫助RNA聚合酶結(jié)合到啟動(dòng)子區(qū)域，激活lacmRNA的轉(zhuǎn)錄，對(duì)lac操縱子實(shí)行正調(diào)控，促進(jìn)合成分解乳糖的三種酶。

簡述脂肪酸的合成和氧化過程。[電子科技大學(xué)2010研]

【答案】

（1）脂肪酸的合成過程

①乙酰CoA羧化酶催化乙酰-CoA消耗ATP羧化成丙二酰-CoA；

②在脂酸合成酶系的作用下，由NADPH提供還力，經(jīng)縮合、加氫、脫水、再加氫等7步不斷重復(fù)進(jìn)行的加成過程，每次延長二個(gè)碳原子，生成16碳的軟脂酸；

③軟脂酸在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或線粒體內(nèi)酶的作用下進(jìn)行碳鏈延長。在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)去飽和酶的作用下合成不飽和脂肪酸。

（2）脂肪酸的β氧化過程

①脂肪酸的活化：脂酰-CoA合成酶催化脂肪酸生成脂酰-CoA。②脂酰-CoA的轉(zhuǎn)移：活化的脂酰-CoA借助肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)至線粒體內(nèi)。

③脂酰-CoA的β氧化：脂肪酸氧化酶系催化脂酰-CoA進(jìn)行脫氫、加水、再脫氫及硫解4步連續(xù)反應(yīng)，生成一分子乙酰-CoA和一分子少兩個(gè)碳原子的脂酰-CoA。

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參考資料：

河南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院《643醫(yī)學(xué)綜合（生物化學(xué)與分子生物學(xué)、免疫學(xué)）》考研全套

周春燕《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》（第9版）配套題庫【考研真題精選＋章節(jié)題庫】

汕頭大學(xué)理學(xué)院《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》考研全套

南京林業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院《826生物化學(xué)與分子生物學(xué)》考研全套

河北醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)《902生理學(xué)》考研全套

大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院《641西醫(yī)綜合（生理學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)、病理學(xué)、內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)）》考研全套

中國科學(xué)院《612生物化學(xué)與分子生物學(xué)》考研全套

北京科技大學(xué)《628生物化學(xué)與分子生物學(xué)》考研全套

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