轉(zhuǎn)座子工具-Transposon tools
什么是轉(zhuǎn)座子?
轉(zhuǎn)座因子或轉(zhuǎn)座子是基因組的主要組成部分。 它們是確定的 DNA 片段,能夠?qū)⒆陨硪苿踊驈?fù)制到基因組內(nèi)和基因組之間的另一個位置,即使這些位置是非同源的。 如今,在生命的三個領(lǐng)域都發(fā)現(xiàn)了多種轉(zhuǎn)座子,并且由于高通量基因組測序的出現(xiàn),鑒定出的轉(zhuǎn)座子數(shù)量不斷增加。
什么是轉(zhuǎn)座酶?
轉(zhuǎn)座酶將 DNA 轉(zhuǎn)座子移動到新位置,不需要轉(zhuǎn)座子和目標(biāo)位點(diǎn)之間的序列同源性。 轉(zhuǎn)座酶包含介導(dǎo) DNA 斷裂和連接的催化結(jié)構(gòu)域。 轉(zhuǎn)座子和轉(zhuǎn)座酶一起形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)-DNA 復(fù)合物,稱為轉(zhuǎn)座體。
是什么讓轉(zhuǎn)座子成為分子生物學(xué)的重要工具?
Mu 轉(zhuǎn)座子具有插入基因組的固有能力和對轉(zhuǎn)座反應(yīng)的簡單要求,這使其成為廣泛應(yīng)用的理想選擇。
轉(zhuǎn)座子末端之間的 DNA 可以設(shè)計(jì)為包括有用的特征,例如選擇標(biāo)記、獨(dú)特的引物結(jié)合位點(diǎn)、報(bào)告功能(例如 β-半乳糖苷酶的基因)、質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)和控制元件(例如受調(diào)節(jié)的啟動子), 這使得轉(zhuǎn)座子適用于許多不同的目的。
圖1.預(yù)切迷你Mu轉(zhuǎn)座子的Mu DNA轉(zhuǎn)位反應(yīng)示意圖。集成會生成 5 個 bp 的目標(biāo)站點(diǎn)重復(fù) (TSD)。