疫情持續(xù)到現(xiàn)在，相信大家對核酸檢測都不陌生了，大部分人都經(jīng)歷過核酸檢測。

那么，為什么通過核酸檢測可以確定人體是否攜帶病毒呢？

核酸檢測的原理是什么呢？

核酸檢測陽性就代表確診新冠肺炎了嗎？

為什么會有假陰性或假陽性的結(jié)果呢？

今天，我們來聊一聊關(guān)于核酸檢測的那些知識！

一、 核酸檢測的原理是什么？

核酸，就是遺傳物質(zhì)，包括脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。根據(jù)遺傳物質(zhì)的不同，可以將病毒分為DNA病毒和RNA病毒，而新冠病毒就是RNA病毒的一種。所以，核酸檢測就是通過檢測受試者體內(nèi)是不是有新冠病毒的RNA來確定他是否攜帶病毒。

目前使用的檢測技術(shù)是熒光定量RT-PCR技術(shù)。具體步驟如下：

1、?提取病毒RNA。

把核酸提取裂解液加入到采集的樣本中，就可以破壞病毒的結(jié)構(gòu)，釋放RNA。

2、?將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。

因為RNA都是單鏈結(jié)構(gòu)，十分不穩(wěn)定，不利于檢測，所以要利用反轉(zhuǎn)錄技術(shù)（RT），用試劑盒中的反轉(zhuǎn)錄酶將它反轉(zhuǎn)錄為更穩(wěn)定的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)。

3、?擴充cDNA。

目的是將上個步驟中得到的cDNA進行擴充，也就是增加它的數(shù)量，用到的技術(shù)是聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）。在擴充的同時，熒光探針也會一起工作。熒光探針的任務(wù)是與新產(chǎn)生的cDNA序列進行結(jié)合，使cDNA序列帶上熒光信號而能被檢測儀識別出來。

4、?檢測、出結(jié)果。

PCR檢測儀可以記錄熒光信號的Ct值。只要新增加一條DNA序列，Ct值就會增加一點。所以，如果樣本中帶有新冠病毒，最終顯示出來的Ct值是一條上升的“S”型曲線，就診斷為核酸檢測陽性患者。反之，沒有上升的曲線就是陰性。

二、 核酸檢測的采樣樣本有哪些？

大家接觸最多的應(yīng)該就是口咽拭子和鼻咽拭子這兩種核酸檢測方式，但是，口咽部或鼻咽部的樣本并不是最佳的采樣樣本。

這是因為，從病毒載量上來看，只有肺里面的載量是最高的，而口咽部或鼻咽部上的病毒是患者呼吸或者咳嗽時帶上來的，可能載量比較小，會影響到核酸檢測結(jié)果的準確性。

所以，肺泡上皮細胞是最好的樣本，其次是氣道上皮細胞，最后是成纖維細胞、內(nèi)皮細胞和巨噬細胞等血液中的細胞。

從樣本類型來看的話，從最佳到最次的樣本順序為：肺泡灌洗液、深痰、鼻咽拭子、口咽拭子、血液。我們國家還增加了肛拭子這個種類，是因為糞便中也可以檢測到病毒，并且比鼻咽拭子和口咽拭子的準確率更高。

但是，由于口咽拭子和鼻咽拭子采樣是最方便的，所以一般采用這兩種采樣方式。

三、 確診新冠肺炎需要哪些檢查結(jié)果？

1、?核酸檢測結(jié)果為陽性

核酸檢測是新冠肺炎的確診金標準。也就是說，只有核酸檢測的結(jié)果呈現(xiàn)陽性，才能考慮確診新冠肺炎。但是，盡管是金標準，結(jié)果也不是100%正確的，還是受到各種客觀和主觀因素的影響。這也是我們經(jīng)常能看到“假陰性”和“假陽性”病例新聞的原因。

2、?典型臨床癥狀

除了核酸檢測結(jié)果呈陽性外，新冠肺炎的確診還需要典型的臨床癥狀。

患者最典型的癥狀就是發(fā)熱和咳嗽，除此之外，可能還有咽喉疼痛、呼吸不暢等。肺部CT的典型癥狀為磨玻璃影、斑片影和實變影。

具備以上兩點，才能確診新冠肺炎。

四、 為什么會有“假陰性”結(jié)果？

自從新冠肺炎發(fā)生后，核酸檢測“假陰性”的事件常有發(fā)生，給疫情的防控帶來了極大的阻礙，“假陰性”的結(jié)果是技術(shù)上的缺陷嗎？為什么沒有辦法消除呢？

“假陰性”就是指某個陽性患者的檢測結(jié)果呈陰性。包括：多次陰性核酸檢測結(jié)果后檢出陽性結(jié)果、多次咽拭子檢測為陰性，但肺泡灌洗液檢測為陽性、核酸檢測呈陰性但CT影像顯示新冠肺炎的特征。

“假陰性”的出現(xiàn)和以下幾個方面有關(guān)：

1、?樣本病毒載量低。

采樣部位、采樣力度和深度、采樣時間點都會影響到采樣時能取到的病毒載量。

首先，前面也提到過，盡管咽拭子是最方便的采樣方式，但它其實并不是最佳的采樣部位。如果患者的癥狀比較輕微，體內(nèi)病毒少，且在核酸檢測前喝過水或者吃過東西，很可能會把咽壁上的病毒沖下去，導(dǎo)致采樣時能采到的病毒載量十分有限，可能出現(xiàn)“假陰性”結(jié)果。

其次，如果核酸檢測的采樣人員在采咽拭子的樣子時，刮取的力度較小，或者深度不夠，也可能會導(dǎo)致樣本病毒載量過小。所以，如果去做核酸檢測時，覺得采樣人員有些太用力，或者太深，造成了被采樣人員的不適感，請給予理解，他們也是為了結(jié)果盡可能準確，減小誤差的發(fā)生。

最后，病毒載量也和患者的病程有關(guān)系。如果患者處于感染初期，或者已經(jīng)快康復(fù)了，這時，他體內(nèi)的病毒量都是相對較少的，就有可能造成“假陰性”。這也是有一些陽性患者轉(zhuǎn)陰后又復(fù)陽的原因。

2、?檢測試劑的質(zhì)量問題。

像診斷試劑的靈敏度、核酸提取效率和純度、病毒變異等因素，都會影響到最終的結(jié)果。

五、核酸檢測陽性=確診？

核酸檢測呈陽性，有3種可能性：假陽性、無癥狀感染者、確診新冠肺炎。

1、?為什么會有“假陽性”？

“假陽性”就是陰性患者的結(jié)果錯為陽性。

“假陽性”結(jié)果的出現(xiàn)基本上是因為樣本在檢測過程中被污染了。也有可能是因為打了疫苗之后出現(xiàn)了“假陽性”的結(jié)果。

2、?無癥狀感染者和確診患者有什么區(qū)別？

前面也提到了，新冠肺炎的確診不僅需要核酸檢測的結(jié)果之外，還需要臨床癥狀的支持。

所以，這兩類人群的區(qū)別就是，是否出現(xiàn)了臨床癥狀。

無癥狀感染者只是核酸檢測為陽性，但并沒有咳嗽、發(fā)熱或CT影像學(xué)特征等臨床癥狀，表明感染程度較輕。

而確診患者，既核酸檢測為陽性，也出現(xiàn)了新冠肺炎的典型臨床癥狀。

但是，這兩類人群都是新冠肺炎的感染者，都具有傳播能力，所以需要集中隔離。