1 玻璃儀器的清洗

?實驗中所用的玻璃儀器清潔與否，直接影響實驗的結果，往往由於儀器的不清潔或被污染而造成較大的實驗誤差，有時甚至會導致實驗的失敗。 做生物化學實驗對玻璃儀器清潔程度的要求，比一般化學實驗的要求更高。這是因為：①生物化學實驗中蛋白質、酶、核酸等往往都是以“毫克”和“微克”計的，稍有雜質，影響就很大。②生物化學實驗對許多常見的污染雜質十分敏感，如金屬離子（鈣、鎂離子等）、去污劑和有機物殘基等，因此玻璃儀器（包括離心管等塑料器皿）是否徹底清洗凈就是非常重要的。

? ⑴ 初用玻璃儀器的清洗

? 新購買的玻璃儀器表面常附著有游離的堿性物質，可先用0.5％的去污劑洗刷，再用自來水洗凈，然后浸泡在1％～2％鹽酸溶液中過夜（不可少于四小時），再用自來水沖洗，最后用無離子水沖洗兩次，在100℃～120℃烘箱內烘干備用。

? ⑵ 使用過的玻璃儀器的清洗

? 先用自來水洗刷至無污物，再用合適的毛刷沾去污劑（粉）洗刷，或浸泡在0.5％的清洗劑中超聲清洗（比色皿決不可超聲），然后用自來水徹底洗凈去污劑，用無離子水洗兩次，烘干備用（計量儀器不可烘干）。清洗后器皿內外不可掛有水珠，否則重洗，若重洗后仍掛有水珠，則需用洗液浸泡數小時后（或用去污粉擦洗），重新清洗。

?⑶ 石英和玻璃比色皿的清洗

決不可用強堿清洗，因為強堿會浸蝕拋光的比色皿。只能用洗液或1％ ～2％的去污劑浸泡，然后用自來水沖洗，這時使用一支綢布包裹的小棒或棉花球棒刷洗，效果會更好，清洗干凈的比色皿也應內外壁不掛水珠。

2 塑料器皿的清洗

? 聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿，在生物化學實驗中已用的越來越多。第一次使用塑料器皿時，可先用8mol/L尿素（用濃鹽酸調pH = 1）清洗，接著依次用無離子水、1 mol/L KOH和無離子水清洗，然后用10—3 mol/L EDTA 除去金屬離子的污染，最后用無離子水徹底清洗，以后每次使用時，可只用0.5％的去污劑清洗，然后用自來水和無離子水洗凈即可。

3 洗液的配制

? 因己確定鉻有致癌作用，因此配制和使用洗液時要極為小心，常用兩種配制方法如下：

?⑴ 取100mL 工業(yè)濃硫酸置于燒杯內，小心加熱，然后慢慢加入5g重鉻酸鉀粉末，邊加邊攪拌，待全部溶解并緩慢冷卻后，貯存在磨口玻璃塞的細口瓶內。

? ⑵ 稱取5g重鉻酸鉀粉末，置于250mL 燒杯中，加5mL 水使其溶解，然后慢慢加入100mL 濃硫酸，溶液溫度將達80℃，待其冷卻后貯存于磨口玻璃瓶內。?

4 其他洗滌液

? ⑴ 工業(yè)濃鹽酸：可洗去水垢或某些無機鹽沉淀。

? ⑵ 5％草酸溶液：用數滴硫酸酸化，可洗去高錳酸鉀的痕跡。

?⑶ 5％～10％磷酸三鈉（Na3PO4?12H2O）溶液：可洗滌油污物。

?⑷ 30％硝酸溶液：洗滌二氧化碳測定儀及微量滴管。

?⑸ 5％～10％乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na2）溶液：加熱煮沸可洗脫玻璃儀器內壁的白色沉淀物。

? ⑹ 尿素洗滌液：為蛋白質的良好溶劑，適用于洗滌盛過蛋白質制劑及血樣的容器。

?⑺ 有機溶劑：如丙酮、乙醚、乙醇等可用于洗脫油脂、脂溶性染料污痕等，二甲苯可洗脫油漆的污垢。

?⑻ 氫氧化鉀的乙醇溶液和含有高錳酸鉀的氫氧化鈉溶液：這是兩種強堿性的洗滌液，對玻璃儀器的侵蝕性很強，可清除容器內壁污垢，洗滌時間不宜過長，使用時應小心慎重。

5 玻璃和塑料器皿的干燥：

? 生化實驗中用到的玻璃和塑料器皿經常需要干燥，通常都是用烘箱或烘干機在110℃～120℃進行干燥，而不要用丙酮蕩洗再吹干的方法來干燥，因為那樣會有殘留的有機物覆蓋在器皿的內表面，從而干擾生物化學反應。硝酸纖維素的塑料離心管加熱時會發(fā)生爆炸，所以決不能放在烘箱中干燥，只能用冷風吹干。

6 移液

?準確的分析方法對于生物化學實驗是極為重要的，在各種生物化學分析技術中，首先要熟練掌握的就是準確的移液技術。為此要用到各種形式的移液管，其中有一些是學生們在化學實驗中未用過而在生化實驗中是常用的。下圖列出了一些生化實驗中常用的移液器具。

?⑴ 滴管（圖1－1 中(E)）

?使用方便，可用于半定量移液，其移液量為1mL—5mL，常用2mL，可換不同大小的滴頭。滴管有長、短兩種，新出一種帶刻度和緩沖泡的滴管，可以比普通滴管更準確地移液，并防止液體吸入滴頭。

? ⑵ 移液管（吸管）

?吸管使用前應洗至內壁不掛水珠，1mL 以上的吸管，用吸管專用刷刷洗，0.1mL、0.2mL和0.5mL 的吸管可用洗滌劑浸泡，必要時可以用超聲清洗器清洗。由于鉻酸洗液致癌，應盡量避免使用。若有大量成批的吸管洗后沖洗，可使用沖洗桶，將吸管尖端向上置于桶內，用自來水多次沖洗后再用蒸餾水或無離子水沖洗。

?吸管分為兩種，一種是無分度的，稱為胖肚吸管（圖1－1 中(F)），精確度較高，其相對誤差A級為0.7％ ~ 0.8％，B級為1.5％ ~ 0.16％，液體自標線流至口端（留有殘液），A級等待15s，B級等待3s。

?另一種吸管為分度吸管（圖1－1 中(G)），管身為一粗細均勻的玻璃管，上面均勻刻有表示容積的分度線，其準確度低于胖肚吸管，相對誤差A級為0.8％ ~ 0.2％，B級為1.6％—0.4％，A級、B級在吸管管身上有A、B字樣，有“快”字則為快流式，有“吹”字則為吹出式，無“吹”字的吸管不可將管尖的殘留液吹出。吸、放溶液前要用吸水紙擦拭管尖。

生化實驗中常用的移液器具

? 血清吸管，其刻度一直刻到管端出口處，由于沒有管尖，不會殘留液體，但需在液體流完后仃留15～20秒，常用于吸取血清等粘度大的液體。移液，用吸水紙蘸出多吸的液體。（1λ= 1(I)微量λ吸管，用于1～500移液，常用于薄層層析和紙層析。毛細微量吸管，用于1～20吸管吸取溶液最常用的是洗耳球。此外，為便于移液，還可以使用新式的吸液球，球上有A、B、C三個玻璃珠閥門，吸液之前，先用拇指和食指按捏A閥，用其他手指擠壓球體，由A閥排氣，使球內形成負壓，插入吸管吸液時，用拇指和食指按捏B閥，將溶液吸至所需刻度，放液時按捏C閥，直至溶液流盡，若需吹出管尖殘液時，可在按捏C閥的同時，用中指擠壓C閥前面的小球泡，即可吹出管尖殘液。 還有一種“吸管泵”使用更為方便，插入吸管后，用拇指轉動上部的小輪，即可使園柱形泵內的柱塞上下移動，將溶液吸入或排出吸管，尤其是在移取10mL 以上的溶液時，用“吸管泵”最為方便。

? ⑶ 微量進樣器

? 微量進樣器常用作氣相和液相色譜儀的進樣器，在生化實驗中主要是用作電泳實驗的加樣器，通?？煞譃闊o存液和有存液兩種。

? ?1) L以下的極微量液體進樣。L無存液微量進樣器： 進樣器的不銹鋼芯子直接通到針尖端處，不會出現存液，所以可用于5L ～50.5

? ?2) L有存液微量進樣器： 不銹鋼的針尖管部分是空管，進樣器的柱塞不能到達，因而管內會存有空氣或液體，其使用注意事項是：①L～10010 不可吸取濃堿溶液，以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件。 ② 因為有存液，所以吸液時要來回多拉幾次，將針尖管內的氣泡全部排盡。 ③ 針尖管內孔極小，使用后，尤其是吸取過蛋白質溶液后，必須立即清洗針尖管，防止堵塞。若遇針尖管堵塞，不可用火燒，只能用φ0.1mm的不銹鋼絲耐心串通。 ④ 進樣器未潤濕時不可來回干拉芯子，以免磨損而漏氣。 ⑤ 若進樣器內發(fā)黑，有不銹鋼氧化物，可用芯子蘸少量肥皂水，來回拉幾次即可除之。

? ⑷ 自動取液器

? 這種取液器在生化實驗中大量地使用，它們主要用于多次重復的快速定量移液，可以只用一只手操作，十分方便。移液的準確度（即容量誤差）為 ±(0.5％～1.5％)，移液的精密度（即重復性誤差）更小些，為 ≤0.5％。

?取液器可分為二種：一種是固定容量的，常用的有100 L等多種規(guī)格。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭，吸頭通常是一次性使用，當然也可以超聲清洗后重復使用，而且此種吸頭還可以進行120℃高壓滅菌。L和5000L、1000L等幾種；另一種是可調容量的取液器，常用的有200L和1000、200

? 可調式自動取液器的操作方法是用拇指和食指旋轉取液器上部的旋鈕，使數字窗口出現所需容量體積的數字，在取液器下端插上一個塑料吸頭，并旋緊以保證氣密，然后四指并攏握住取液器上部，用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕，向下按到第一停點，將取液器的吸頭插入待取的溶液中，緩慢松開按鈕，吸上液體，并停留1～2秒鐘（粘性大的溶液可加長停留時間），將吸頭沿器壁滑出容器，用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體，排液時吸頭接觸傾斜的器壁，先將按鈕按到第一停點，停留一秒鐘（粘性大的液體要加長停留時間），再按壓到第二停點，吹出吸頭尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸頭，可按下除吸頭推桿，將吸頭推入廢物缸。

? 自動取液器的使用注意事項是： ① 吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。 ② 為獲得較高的精度，吸頭需予先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時，吸頭內壁會殘留一層“液膜”，造成排液量偏小而產生誤差。③ 濃度和粘度大的液體，會產生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調節(jié)旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。④ 可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法，來校正取液器，1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。