常用的鈣離子探針
1、RHOD-2, AM:在所有的鈣離子指示劑中,Rhod 2熒光信號(hào)的波長(zhǎng)最長(zhǎng)。RHOD-2, AM具有和羅丹明類(lèi)似的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng),分別為557 nm和581 nm。這樣的激發(fā)波長(zhǎng)使得我們很容易就能找到氬和氪光源的激光。盡管有人認(rèn)為Rhod 2的熒光信號(hào)僅僅將鈣復(fù)合物的熒光增加了數(shù)倍,但是BIOFOUNT的Rhod 2由于具有很高的純度,能有效地將鈣熒光信號(hào)增加80-100倍左右,使得它的信號(hào)強(qiáng)度在所有的鈣離子探針里面是最強(qiáng)的。
圖1.RHOD-2, AM光譜圖
2、Fura Red:是一種可見(jiàn)光可激發(fā)的fura-2類(lèi)似物,當(dāng)與單激發(fā)綠色熒光鈣指示劑一起使用時(shí),它為通過(guò)微量光度法、成像法或流式細(xì)胞術(shù)對(duì)單細(xì)胞中鈣離子進(jìn)行比例測(cè)量提供了獨(dú)特的可能性。吸收波長(zhǎng) (λmax) 455 ± 3 nm (甲醇),熒光波長(zhǎng) (λmax) 598 ± 4 nm (甲醇)
圖2.Fura Red光譜圖
3、Fluo-3 AM:是一種可見(jiàn)光波長(zhǎng)鈣探針,可通過(guò)熒光細(xì)胞儀檢測(cè)。通過(guò)與染料的五乙酰氧基甲酯一起孵育,F(xiàn)luo-3AM 可以加載到淋巴細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中。 一旦進(jìn)入細(xì)胞,酯就會(huì)被水解,產(chǎn)生真正的鈣熒光探針FIuo,3-AM,能夠指示 Ca2+ 的變化。該鈣熒光探針 FIuo,3-AM 可在不干擾細(xì)胞內(nèi)條件的情況下監(jiān)測(cè) Ca2+ 水平。 此外,該試劑被認(rèn)為是評(píng)估各種條件下線(xiàn)粒體 Ca2+ 變化的濃度和動(dòng)力學(xué)的有效探針。吸收波長(zhǎng)(λmax)464±3 nm(甲醇)。
圖3.Fluo-3 AM光譜圖