SILAC技術(shù)和免疫共沉淀法結(jié)合質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)
免疫共沉淀(Co-IP)是基于免疫學(xué)原理研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,通過(guò)使用靶蛋白特異性抗體來(lái)間接捕獲與特定靶蛋白結(jié)合的蛋白,從而識(shí)別生理相關(guān)的蛋白-蛋白相互作用,并可通過(guò)質(zhì)譜技術(shù)來(lái)鑒定新的相互作用蛋白質(zhì)。
SILAC(Stable isotope labeling using amino acids in cell culture)細(xì)胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)是一種基于同位素標(biāo)記的蛋白定量技術(shù)。SILAC方法使用體內(nèi)新陳代謝將13C或15N標(biāo)記的氨基酸摻入蛋白質(zhì),然后進(jìn)行質(zhì)譜分析,以加速蛋白質(zhì)的全面鑒定、表征和定量。
SILAC與免疫共沉淀質(zhì)譜聯(lián)用(SILAC-CoIP-MS)使用SILAC方法標(biāo)記實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,然后進(jìn)行Co-IP實(shí)驗(yàn)獲取相互作用的蛋白質(zhì),并利用質(zhì)譜進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。SILAC從源頭上引入了質(zhì)量差異,減少了實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)誤差,并且定量信息豐富,準(zhǔn)確度高。因此,SILAC-CoIP-MS也被稱為研究蛋白質(zhì)相互作用和定量分析蛋白質(zhì)相互作用的金標(biāo)準(zhǔn)。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合nanoLC-MS/MS納升色譜提供SILAC與免疫共沉淀質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析服務(wù)技術(shù)包裹,您只需要將您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們并將您的細(xì)胞寄給我們,我們會(huì)負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜,包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞標(biāo)記、蛋白提取、抗體IP、效率檢測(cè)、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析,歡迎免費(fèi)咨詢。