光學(xué)顯微鏡原理
? ? ???載物臺(tái)和物鏡兩者必須能沿物鏡光軸方向作相對(duì)運(yùn)動(dòng)以實(shí)現(xiàn)調(diào)焦,獲得清晰的圖像。用高倍物鏡工作時(shí),容許的調(diào)焦范圍往往小于微米,所以顯微鏡必須具備極為精密的微動(dòng)調(diào)焦機(jī)構(gòu)。 顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率,顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個(gè)物點(diǎn)的最小間距。分辨率和放大倍率是兩個(gè)不同的但又互有聯(lián)系的概念。 當(dāng)選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大,即分辨率不夠高時(shí),顯微鏡不能分清物體的微細(xì)結(jié)構(gòu),此時(shí)即使過(guò)度地增大放大倍率,得到的也只能是一個(gè)輪廓雖大但細(xì)節(jié)不清楚的圖像,稱(chēng)為無(wú)效放大倍率。反之如果分辨率已經(jīng)滿(mǎn)足要求而放大倍率不足,則顯微鏡雖已具備分辨能力,但因圖像太小而仍然不能被人眼清晰視見(jiàn)。所以為了充分發(fā)揮顯微鏡的分辨能力,應(yīng)使數(shù)值孔徑與顯微鏡總放大倍率合理匹配。 聚光照明系統(tǒng)是對(duì)顯微鏡成像性能有較大影響,但又是易于被使用者忽視的環(huán)節(jié)。它的功能是提供亮度足夠且均勻的物面照明。聚光鏡發(fā)來(lái)的光束應(yīng)能保證充滿(mǎn)物鏡孔徑角,否則就不能充分利用物鏡所能達(dá)到的最高分辨率。為此目的,在聚光鏡中設(shè)有類(lèi)似照明物鏡中的,可以調(diào)節(jié)開(kāi)孔大小的可變孔徑光闌,用來(lái)調(diào)節(jié)照明光束孔徑,以與物鏡孔徑角匹配。 改變照明方式,可以獲得亮背景上的暗物點(diǎn)(稱(chēng)亮視場(chǎng)照明)或暗背景上的亮物點(diǎn)(稱(chēng)暗視場(chǎng)照明)等不同的觀察方式,以便在不同情況下更好地發(fā)現(xiàn)和觀察微細(xì)結(jié)構(gòu)。