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超全超實用的細胞代謝研究工具:糖酵解活性分析試劑盒

2020-12-15 16:55 作者:艾美捷  | 我要投稿

細胞代謝中的化學反應可以歸納為代謝途徑,通過一系列酶的作用將一種化學物質(zhì)轉(zhuǎn)化為另一種化學物質(zhì)。酶對于細胞代謝反應來說是非常重要的,因為酶可以通過一個熱力學上易于發(fā)生的反應來驅(qū)動另一個難以進行的反應,使之變得可行;例如,利用ATP的水解所產(chǎn)生的能量來驅(qū)動其他化學反應。一個生物體的代謝機制決定了哪些物質(zhì)對于此生物體是有營養(yǎng)的,而哪些是有毒的。

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注:由于篇幅限制,以下每一種代謝舉一個相關(guān)案例。

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一、糖酵解

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糖酵解是指葡萄糖在細胞內(nèi)被分解為丙酮酸和ATP。利用一系列酶將每個六碳葡萄糖分子轉(zhuǎn)化為2個三碳丙酮酸分子的10個步驟。該途徑實際上是原核生物和真核生物所有細胞共有的。在真核細胞中,糖酵解發(fā)生在細胞質(zhì)中。該途徑包括三個階段:1)葡萄糖轉(zhuǎn)化為1,6-二磷酸果糖;2)1,6-二磷酸果糖裂解為兩個三碳片段;3)三碳片段氧化為丙酮酸(獲得ATP和NADH)。關(guān)鍵的調(diào)節(jié)酶是磷酸果糖激酶,糖酵解第3步為不可逆反應,是整個過程的限速步驟。

甘油三酯是機體儲存能量及氧化供能的重要形式。合成甘油三酯所需的甘油及脂肪酸主要由葡萄糖代謝提供。不同組織以不同途徑合成甘油三酯。肝細胞和脂肪細胞的合成途徑:甘油二酯途徑。小腸黏膜細胞的合成途徑:甘油一酯途徑。甘油三酯的分解代謝即脂肪動員,儲存在脂肪細胞中的脂肪,被脂肪酶逐步水解為游離脂酸(FFA)及甘油并釋放入血液,被其他組織氧化利用的過程。

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輔酶是與酶結(jié)合以幫助催化反應的有機分子。通常與酶的活性位點結(jié)合并有助于底物募集。輔酶與酶一樣,可以重復循環(huán)使用,而不會改變反應速率或效果。大多數(shù)是維生素,維生素衍生物或核苷酸形式。輔因子是“輔助分子”,在本質(zhì)上可以是無機的或有機的。通常包括金屬離子,例如鐵,鋅,鈷和銅。由于大多數(shù)生物體都不能合成金屬離子,因此必須在飲食中補充。輔酶和輔因子在許多細胞代謝反應中發(fā)揮著不可或缺的作用,在結(jié)構(gòu)和功能上都起到催化作用。

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案例:葡萄糖-6-磷酸脫氫酶是一種存在于細胞之中,協(xié)助葡萄糖進行新陳代謝的酶,在這代謝過程中會產(chǎn)生NADPH以保護血細胞免受氧化物質(zhì)的威脅.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏時,若身體接觸到具氧化性的特定物質(zhì)或服用了這類藥物,血細胞就容易被破壞而發(fā)生急性溶血反應.

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葡萄糖-6-磷酸脫氫酶 活性分析試劑盒,貨號:700300,http://www.amyjet.com/products/700300-96.shtml:細胞裂解液和組織勻漿中的G6PDH活性

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二、脂質(zhì)代謝(Lipids Metabolism):

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脂肪代謝是體內(nèi)重要且復雜的生化反應,指生物體內(nèi)脂肪,在各種相關(guān)酶的幫助下,消化吸收、合成與分解的過程,加工成機體所需要的物質(zhì),保證正常生理機能的運作,對于生命活動具有重要意義。脂類是身體儲能和供能的重要物質(zhì),也是生物膜的重要結(jié)構(gòu)成分。

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案例:甘油三酯(TG)是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子.甘油三酯是人體內(nèi)含量zui多的脂類,大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量,同時肝臟、脂肪等組織還可以進行甘油三酯的合成,在脂肪組織中貯存.

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甘油三酯分析試劑盒(比色法),貨號:10010303:測定血漿,血清,細胞裂解液和組織勻漿樣品中的甘油三酯

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三、蛋白質(zhì)代謝

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蛋白質(zhì)代謝表示負責合成蛋白質(zhì)和氨基酸(合成代謝)的各種生化過程,以及通過分解代謝分解蛋白質(zhì)。

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案例:腸肽酶,又稱腸激酶,也稱腸致活酶.是十二指腸細胞分泌的一種蛋白質(zhì)水解酶,選擇性作用于胰蛋白酶分子上第6位賴氨酸和第7位異亮氨酸之間的肽鍵,水解釋放出一段6肽,使胰蛋白酶原激活形成有活性的胰蛋白酶.這是形成胰蛋白酶的主要步驟,此過程不受胰蛋白酶抑制.是分子量約10萬的含糖蛋白質(zhì).

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腸肽酶活性分析試劑盒(熒光法),貨號:K758-100:測量生物樣品中的腸肽酶活性或純化的腸肽酶活性

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四、輔酶和輔因子(Coenzymes & Cofactors)

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輔酶是一大類有機輔助因子的總稱,是酶催化氧化還原反應、基團轉(zhuǎn)移和異構(gòu)反應的必須因子。它們在酶催化反應中承擔傳遞電子、原子或基團的功能。輔酶也可以被視為第二底物,因為在催化反應發(fā)生時,輔酶發(fā)生的化學變化與底物正好相反。

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輔因子(Cofactor)是指與酶(酵素)結(jié)合且在催化反應中必要的非蛋白質(zhì)化合物。某些分子如水合部分常見的離子所扮演的角色和輔因子相當類似,但由于含量不受限制且普遍存在,因此不歸類為輔因子。

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案例:NAD分析試劑盒,藍色熒光,煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)是在細胞中找到的兩個重要的輔因子。NADH由NAD+加H還原得到,NAD+由NADH氧化而來。在腺嘌呤核苷酸的2’位通過酯鍵連接加上一個磷酸基團,構(gòu)成NADP。NADP用于生物合成代謝反應中,例如脂肪酸和核酸的合成;需要NADPH作為還原劑。在葉綠體中,NADP作為氧化劑,在光合作用的初步反應中非常重要。NADPH由光合作用產(chǎn)生,接著作為還原力用于光合作用中卡爾文循環(huán)中的生物合成反應。傳統(tǒng)的NAD/NADH和NADP/NADPH的檢測是通過測定NADH或者NADPH在340nm處的吸光值。這種方法靈敏度低,且受嚴重干擾;因為檢測在紫外光范圍內(nèi),需要昂貴的石英微孔板。

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NAD分析試劑盒,藍色熒光,貨號:AAT-15280:可快速靈敏地檢測NAD(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)

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五、?無機離子(Inorganic Ions)

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影響生物水結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的因素?無機離子生命體系中大量存在的無機離子的靜電荷,使水分子圍繞其周圍徑向排列,形成有序的離子水化層。

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案例:氨是生物系統(tǒng)中重要的氮源.蛋白質(zhì)的組成單位是氨基酸,而氨基酸的合成需要氮源.氨是氨基酸降解代謝的產(chǎn)物之一.它在正常和異常的動物生理機能(比如酸堿度平衡)中都起著重要作用.

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氨檢測分析試劑盒,貨號:K370-100:提供了一種方法來檢測各種樣品中氨的含量,快速靈敏可靠,并能進行高通量檢測.在氨檢測分析試劑盒的原理是,樣本內(nèi)的氨被轉(zhuǎn)化成一種中間產(chǎn)物,該中間產(chǎn)物可以與OxiRed探針發(fā)生反應,zui終的反應產(chǎn)物顯現(xiàn)顏色(λmax = 570 nm),用微量平板讀數(shù)器迅速定量.本試劑盒檢測J限是1nmol(~20 M),比基于NADP的測氨方法要靈敏得多.

細胞代謝鏈接:

http://www.amyjet.com/featured/glycolysis.shtml


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