薄層色譜法四個檢查方法
一、雜質對照品法
適用于已知雜質并能制備雜質對照品的情況。
方法:根據雜質限量,取供試品溶液和一定濃度的雜質對照品溶液,分別點樣與同一薄層板上,展開,斑點定位。供試品溶液除主斑點外的其他斑點與相應的雜質對照品溶液或系列濃度雜質對照品溶液的相應主斑點進行比較。判斷藥物中雜質限量是否合格。
二、供試品溶液的自身稀釋對照法
適用于雜質的結構不確定;或者雖然雜質結構已知,但是沒有雜質對照品的情況。該法僅限于雜質斑點的顏色與主成分斑點顏色相同或相近的情況下使用。
方法:先配置一定濃度的供試品溶液,然后供試品溶液按限量要求稀釋至一定濃度作為對照溶液,將供試品溶液和對照溶液分別點樣與同一薄層色譜法上,展開,斑點定位。供試品溶液所顯雜質斑點與自身稀釋對照溶液或系列濃度自身稀釋對照溶液的相應主斑點比較,不得更深。
三、兩法并用法
當藥物中存在多個雜質時,若已知雜質有對照品,則采用雜質對照品法檢查,,共存的未知雜質或沒有對照品的雜質,則可同時采用供試品溶液的自身稀釋對照法。
四、對照物法
當無合適的雜質對照品,或者是供試品顯示的雜質斑點顏色與主成分斑點顏色有差異,難以判斷限量時,可采用與供試品相同的藥物作為對照,對照藥物所含待檢雜質需符合限量要求,且穩(wěn)定性好。