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艾美捷M199 細(xì)胞培養(yǎng)基的用途和使用說明

2022-11-18 14:28 作者:艾美捷  | 我要投稿

1950年,摩根、莫頓和帕克描述了第一個完全定義的媒介之一,它在很大程度上不依賴動物產(chǎn)品或提取物作為營養(yǎng)來源。該培養(yǎng)基支持原代雞胚心臟細(xì)胞的生長。自那以后,它被稱為培養(yǎng)基199。

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艾美捷M199?細(xì)胞培養(yǎng)基目前的用途是在病毒和疫苗生產(chǎn)中添加血清,以及培養(yǎng)許多非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。它也與不太復(fù)雜的介質(zhì)結(jié)合使用。用厄爾平衡鹽修飾的培養(yǎng)基199設(shè)計用于在環(huán)境(非CO2)大氣條件下保持的細(xì)胞。M2852與原始配方的不同之處在于包含所有L-氨基酸。原始配方含有10種DL氨基酸,以每克計,其生物活性低于相應(yīng)的L-氨基酸。



尋找一種替代血清的合成培養(yǎng)基來維持體外細(xì)胞的研究始于19世紀(jì)末,并一直持續(xù)至今。Ringer、Locks和Tyrode用添加了葡萄糖的生理鹽水代替血清,從而為定義培養(yǎng)基的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。隨著生化和分析技術(shù)的改進(jìn),血清中的維生素、激素和氨基酸等更多成分已被鑒定并納入生理鹽溶液中,從而降低并在某些情況下消除了作為介質(zhì)補充所需的動物血清濃度。盡管在生產(chǎn)完全限定的培養(yǎng)基方面對原始配方進(jìn)行了許多修改,但鹽溶液在組織培養(yǎng)中仍然發(fā)揮著重要作用。鹽溶液的基本功能是維持培養(yǎng)基中的pH值和滲透平衡,為細(xì)胞提供水和必需的無機離子,這在今天和一個世紀(jì)前首次開發(fā)時一樣有價值。

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厄爾平衡鹽的選擇受以下因素的強烈影響:

1.?細(xì)胞類型,

2.?單層培養(yǎng)的類型,懸浮液,克隆,以及

3.?化學(xué)定義的必要程度。回顧有關(guān)特定細(xì)胞系所需培養(yǎng)基、補充物和生理參數(shù)的建議的文獻(xiàn)很重要。

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艾美捷M199?細(xì)胞培養(yǎng)基每升說明

將9.4g溶解在800-900ml ddH2O中,輕輕攪拌直至完全溶解。如果需要,添加0.35g碳酸氫鈉。將培養(yǎng)基的pH值調(diào)整至所需水平。添加額外的水,使溶液達(dá)到1L。使用0.22微米膜過濾器進(jìn)行過濾消毒。等分到無菌容器中。不要高壓釜。含有不穩(wěn)定的化合物,可能會因高壓滅菌而損壞。

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儲存和穩(wěn)定性:

在室溫下儲存粉狀介質(zhì)??煞€(wěn)定12個月。打開的瓶子應(yīng)蓋緊蓋子,并保持在黑暗、低濕度的環(huán)境中。準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基應(yīng)保持在4°C,并在短時間內(nèi)使用。

注:僅供研究使用,不得用于人類、治療或診斷應(yīng)用。

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艾美捷M199?細(xì)胞培養(yǎng)基文獻(xiàn)參考:

1.?Morgan, J.F., Morton, H.J. and Parker, R.C. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 73:1-8 (1950). 2. Morgan, J.F., Campbell, E. and Morton, H.J. J.N.C.I. 16:2, 557-567 (1955)


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