ANEXT安齡生物·外泌體每周速遞030

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1、仿病毒細胞納米囊泡實現(xiàn)高效胞漿給藥

紐州立賓漢姆頓大學(xué)萬源教授團隊前期研究發(fā)現(xiàn)，通過物理擠壓細胞技術(shù)獲得的納米囊泡（CNV）可做為天然EV的替代。供體細胞經(jīng)機械性擠壓制備CNV的生產(chǎn)效率是EV的50-100倍，而生產(chǎn)成本不到EV的10%。該團隊近期研究還發(fā)現(xiàn)CNV和EV的膜蛋白近似度超過70%，且CNV的批間變異可以限制在10%以內(nèi)。以上研究提示CNV可作為EV替代品用于藥物載體。

本研究中，該團隊開發(fā)了對病毒進行仿生的CNV，即eFT-CNV（effective CNV）。研究人員先用CRISPR/CAS9將MHC-I和GPC3從HEK293細胞膜上敲除。MHC-I會遞呈母細胞異?？乖?，招致巨噬細胞的吞噬，敲除MHC-I可降低CNV的免疫原性。為避免因后續(xù)在細胞表面表達抗GPC3的scFV而產(chǎn)生CNV自聚體現(xiàn)象，導(dǎo)致可能的eFT-CNV收集失敗，故敲除GPC3。進一步，用慢病毒感染細胞，使其依次表達抗GPC3的scFv和工程化的病毒膜融合蛋白。需注意的是，該工程化的膜融合蛋白不具備和靶分子結(jié)合的能力，但保留了促膜融合能力。其后，物理性擠壓構(gòu)建成功的HEK293細胞收獲eFT-CNV。eFT-CNV通過抗GPC3的scFv結(jié)合至GPC3高表達腫瘤細胞表面，再由膜融合蛋白促發(fā)膜融合，從而完成腫瘤細胞胞漿內(nèi)遞藥。

2、發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤干細胞調(diào)控巨噬細胞極化新機制

近日，蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院神經(jīng)外科董軍教授團隊在CNS Neuroscience & Therapeutics（中科院一區(qū)）上發(fā)表了題為“Exosomal miR-6733-5p mediates cross-talk between glioblastoma stem cells and macrophages and promotes glioblastoma multiform progression synergistically”的文章，該研究揭示了GSCs分泌的外泌體miR-6733-5p誘導(dǎo)巨噬細胞M2型極化，進一步提高了GSCs的自我更新能力和干性表達。

該研究確定了GSCs及其分泌的外泌體能誘導(dǎo)巨噬細胞M2型極化，極化后的M2巨噬細胞進一步提高了GSCs的自我更新能力和干性表達。鑒于外泌體已被證明可以運輸miRNAs調(diào)控受體細胞功能，研究發(fā)現(xiàn)miR-6733-5p在膠質(zhì)母細胞瘤患者的手術(shù)標(biāo)本中富集，在GSCs衍生的外泌體中高度表達，并通過外泌體遞送至巨噬細胞靶向IGF2BP3激活A(yù)KT信號通路從而介導(dǎo)M2型巨噬細胞的極化。這些數(shù)據(jù)表明，GSCs產(chǎn)生富含miR-6733-5p的外泌體，誘導(dǎo)巨噬細胞的M2型極化，以增強GSCs的干性并促進腫瘤的惡性進展。靶向外泌體miR-6733-5p可能提供一個潛在的對抗膠質(zhì)母細胞瘤的新策略。

3、M2型巨噬細胞來源外泌體通過免疫調(diào)節(jié)促進糖尿病骨折愈合

近期，上海大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院蘇佳燦教授團隊在科愛出版創(chuàng)辦的期刊 Bioactive Materials 上聯(lián)合發(fā)表題為“M2 macrophage-derived exosomes promote diabetic fracture healing by acting as an immunomodulator”的研究論文，發(fā)現(xiàn)M2外泌體可作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，通過激活M1型巨噬細胞中PI3K/AKT信號通路促進其向M2型巨噬細胞極化，改善骨免疫微環(huán)境，進而加速T2DM骨折愈合。

在這項研究中，作者首先提取了M2外泌體，并利用它們干預(yù)糖尿病骨折的骨修復(fù)。結(jié)果表明，M2外泌體通過降低M1型巨噬細胞比例進而調(diào)控骨免疫微環(huán)境，從而加速糖尿病骨折愈合。作者進一步證實M2外泌體通過激活PI3K/AKT信號通路誘導(dǎo)M1型巨噬細胞轉(zhuǎn)化為M2型巨噬細胞。該研究為M2外泌體促進糖尿病骨折愈合提供了新的視角和潛在的治療方法。

4、工程化細胞外囊泡通過PD-L1/PD-1軸改善1型糖尿病

近日，南開大學(xué)王悅冰團隊在利用工程化MSC-EVs治療T1D方面取得新進展，最新在國際權(quán)威學(xué)術(shù)期刊Small上發(fā)表題為“Engineered Cytokine-Primed Extracellular Vesicles with High PD-L1 Expression Ameliorate Type 1 Diabetes”的文章。該團隊首次利用炎癥因子賦能MSC-EVs后，通過負載FDA批準(zhǔn)的小分子藥物5-氨基乙酰丙酸己酯鹽酸鹽（HAL），實現(xiàn)了T1D成像治療一體化。構(gòu)建的H@TI-EVs長期治療體系不僅在T1D小鼠中具有良好的損傷胰腺靶向能力，而且通過調(diào)控PD-L1/PD-1軸發(fā)揮優(yōu)異的免疫抑制和治療能力。

基于該課題組前期EVs的研究基礎(chǔ)，針對MSC-EVs在T1D中體內(nèi)動態(tài)變化不明、治療效果偏低等問題，該團隊提出利用炎癥因子TNF-α和IFN-γ處理MSCs，觸發(fā)其“短期記憶”效應(yīng)，提高其分泌MSC-EVs的免疫抑制及損傷修復(fù)能力，再負載兼具成像和抗炎作用的小分子藥物HAL，構(gòu)建了工程化H@TI-EVs納米體系。體外實驗結(jié)果表明，H@TI-EVs具有更好的免疫抑制、抗炎和抗凋亡能力。在T1D小鼠體內(nèi)，通過HAL分解產(chǎn)物原卟啉IX（PpIX）介導(dǎo)的熒光成像，研究者動態(tài)觀察到H@TI-EVs特異性靶向損傷胰腺，在損傷胰島聚集。在此基礎(chǔ)上，分別對T1D小鼠進行長期（H@TI-EVs-l）和短期（H@TI-EVs-s）治療，發(fā)現(xiàn)H@TI-EVs長期治療組可以顯著降低T1D小鼠的血糖水平，促進胰島素的分泌，恢復(fù)T1D小鼠的血糖調(diào)節(jié)能力。進一步研究發(fā)現(xiàn)，H@TI-EVs-l通過調(diào)控PD-L1/PD-1信號通路抑制CD4+ T細胞活化，降低胰腺中T細胞的浸潤水平。而且該納米體系還有效降低了胰腺中巨噬細胞募集，并誘導(dǎo)巨噬細胞M1型到M2型的轉(zhuǎn)變，有效重塑了免疫微環(huán)境。這項研究構(gòu)建的工程化EVs體系易于制備，具有良好的生物安全性、相容性及治療效果，為T1D的臨床治療提供了新思路及重要理論實驗基礎(chǔ)。

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