2023年USP頒布了《Analytical Procedures for mRNA Vaccine Quality》第二版，以下簡(jiǎn)稱指南。在距離去年春季頒布指南第一版已經(jīng)過(guò)去了一年，在這一年里，USP 收到了來(lái)自全球超過(guò)300份反饋意見(jiàn)，針對(duì)這些建議USP都做出了回應(yīng)，并經(jīng)過(guò)專家委員會(huì)和美國(guó)藥典的疫苗顧問(wèn)委員會(huì)進(jìn)行評(píng)估審核和研究，在新版中做出了更新。

自然mRNA是在真核細(xì)胞細(xì)胞中的DNA通過(guò)RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄而成。這些mRNA分子被運(yùn)輸出細(xì)胞核到細(xì)胞質(zhì)中，作為翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)的模板。存儲(chǔ)在基因組中的信息就被用來(lái)表達(dá)特定的蛋白質(zhì)。

有兩種最常見(jiàn)的mRNA疫苗結(jié)構(gòu)，一種是被稱為不可自復(fù)制mRNA，見(jiàn)圖1 A),另一種是自復(fù)制mRNA ,見(jiàn)圖1 B）。以不可自復(fù)制mRNA為例，一種完整的mRNA包括5’帽子結(jié)構(gòu)，5’UTR，開(kāi)放閱讀框（ORF），3’UTR 和3’PolyA 尾

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mRNA原料藥生產(chǎn)過(guò)程中，最常用的就是使用PCR 產(chǎn)物或者質(zhì)粒作為模板。質(zhì)粒也會(huì)通過(guò)轉(zhuǎn)化大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)增。本次最新版的指南新增質(zhì)粒檢測(cè)的指標(biāo)和推薦方案，質(zhì)粒放行之前必須對(duì)其準(zhǔn)確性，濃度，純度、安全性進(jìn)行檢測(cè)和質(zhì)控。

mRNA生產(chǎn)過(guò)程中需要進(jìn)行原料藥制備，然后再進(jìn)行制劑的制備。mRNA原料藥的制備可分為兩個(gè)基本步驟：上游酶促過(guò)程和下游超濾純化。新版指南對(duì)原料藥制備質(zhì)量分析標(biāo)準(zhǔn)和方法進(jìn)行了細(xì)化，具體見(jiàn)圖4

mRNA疫苗需要合適的遞送系統(tǒng)，例如聚合物、基于聚合物納米顆粒、脂質(zhì)或脂質(zhì)納米顆粒（LNP）以及其他遞送方式。LNP是目前是最常見(jiàn)的，并已被證明是安全有效的遞送系統(tǒng)。新版指南也對(duì)基于LNP遞送的mRNA制劑生產(chǎn)制訂了相應(yīng)的指標(biāo)和方法，具體見(jiàn)圖5

mRNA質(zhì)控利器-安捷倫片段化分析儀

安捷倫片段化分析儀基于毛細(xì)管陣列原理，是指南中點(diǎn)名推薦的質(zhì)控平臺(tái)，主要用于質(zhì)粒質(zhì)控（貨號(hào)：DNF-940-K0500）?和mRNA完整性檢測(cè)（貨號(hào)DNF-471-0500/1000）。片段化分析儀提供專門針對(duì)DNA和RNA分析的試劑盒，擁有通量高，靈敏度高，分辨率高，自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，配套分析軟件PROSIZE 提供定量和定性分析，提供數(shù)字化評(píng)判核酸質(zhì)量的方法，清晰簡(jiǎn)便。?

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