圖1. T細胞激動受體與抑制受體

前天給專家過幻燈之際，對于4-1BB這個免疫激動劑，有了初步的認知，為了加深印象，整理如下。

除了聚焦以PD-1/PD-L1、LAG-3等為代表的免疫檢查點以外，也有不少企業(yè)開始將目光放在T細胞激動劑的研發(fā)上，包括靶向OX40，CD27，CD40，GITR和4-1BB的抗體。

本文綜述4-1BB（CD137）靶點在研藥物的進展，以饗讀者。

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4-1BB靶點介紹

4-1BB的全稱是腫瘤壞死因子受體超家族成員9(TNFRSF9)重組蛋白，又稱CD137，最初由醫(yī)學家們于上世紀80年代，從活化的T細胞中發(fā)現(xiàn)。因此早期認為4-1BB表達限于活化的T細胞，但后期研究發(fā)現(xiàn)4-1BB在整個造血和非造血細胞室中廣泛表達。例如DC，活化的單核細胞和NK細胞，嗜中性粒細胞，嗜酸性粒細胞和肥大細胞。在NK細胞上，4-1BB信號傳導(dǎo)可以增加抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性（ADCC）。作為免疫活性的多功能調(diào)節(jié)劑，4-1BB已成為癌癥免疫療法中有待探索的極具希望的靶標。

圖2. 抗4-1BB療法的免疫調(diào)節(jié)作用

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4-1BB激動性抗體在既往臨床前和早期臨床研究中被證實是有潛力的，然而，盡管表現(xiàn)出良好的初步療效信號，更多的臨床開發(fā)卻止步于有限的治療窗。Urelumab（全人源IgG4 mAb）是一個4-1BB強激動性的單抗，在I/II期試驗中表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性，但作為單藥治療的更多研發(fā)卻受阻于以血清轉(zhuǎn)氨酶水平升高為特征的劑量限制肝毒性。相比之下，Utomilumab?（人源化IgG2 mAb）是一個4-1BB弱激動性的單抗，盡管表現(xiàn)出更好的肝臟安全性，但作為單藥治療抗腫瘤活性十分有限。

圖3. 腫瘤靶向的雙特異性抗體促進腫瘤靶細胞附近的T淋巴細胞活化

許多研究顯示，4-1BB激動劑的毒性，與其特殊的Fc段結(jié)構(gòu)相關(guān)，因此新一代的藥物，要么去除其Fc段結(jié)構(gòu)、另一端融合其它抗體(如結(jié)合EGFR抗體)，要么改造其Fc段，消除抗體與受體之間的相互作用。因此，聯(lián)合治療和二代藥物開發(fā)成為拓寬4-1BB靶向藥物治療窗的目標。以4-1BB為靶點的雙抗成為研發(fā)的一個熱點領(lǐng)域。

PD-L1/4-1BB雙抗進展

雙特異性抗體（bsAb）技術(shù)為研發(fā)出比單靶點抗體或其混合物更優(yōu)的或新型的免疫治療藥物提供了機會。進展最快的就是PD-L1/4-BB雙抗（GEN1046），是一個靶向PD-L1和4-1BB的雙抗，也是二代檢查點免疫治療，通過阻斷PD-1/L1抑制通路、有條件的4-1BB刺激，增強T細胞和NK細胞的功能。本文以近期發(fā)表了人體臨床前特征和首次人體研究結(jié)果的?GEN1046（PD-L1×4-1BB）為例，淺析4-1BB為基礎(chǔ)靶點的雙抗的優(yōu)勢。

GEN1046是一個全長IgG1亞型、?PD-L1×4-1BB雙抗，使用DuoBody?技術(shù)平臺，通過單克隆全人源PD-L1和人源化4-1BB抗體的Fab臂交換產(chǎn)生，基于雙特異性模式的體外生物活性選擇母代PD-L1和4-1BB抗體。母代抗體包含CH3結(jié)構(gòu)域的對應(yīng)突變F405L/K409R（促使Fab臂的異源二聚化，生成雙特異性分子）和Fc沉默突變?L234F/L235E/D265A（阻止結(jié)合FcγR和C1q，去除ADCC、ADCP和CDC效應(yīng)）。

圖4. GEN1046的結(jié)構(gòu)

2.1?GEN1046在小鼠體內(nèi)表現(xiàn)出抗腫瘤活性

采用人PD-L1(hPD-L1)和4-1BB胞外結(jié)構(gòu)域工程改造的雙敲入(dKI)轉(zhuǎn)基因C57BL/6小鼠，皮下植入hPD-L1轉(zhuǎn)染的MC38腫瘤細胞接瘤以評估GEN1046的抗腫瘤活性。GEN1046 5mg/kg，每周給藥兩次，給藥3周期，所有小鼠都達到完全腫瘤退縮，相較于對照組，明顯延長了PFS。9只完全腫瘤退縮的小鼠中，6例再接種MC38-hPD-L1腫瘤細胞，無腫瘤生長，這表明GEN1046經(jīng)治的小鼠已經(jīng)產(chǎn)生免疫記憶。

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圖5.GEN1046在MC38- hPD-L1荷瘤hPD-L1/h4-1BBdKI小鼠模型中的療效

2.2 GEN1046首個人體試驗結(jié)果

I/IIa期試驗（NCT03917381）的劑量遞增階段共納入61例晚期實體瘤患者，接受GEN1046? 9個遞增劑量水平（25-1200mg Q3W），常見的腫瘤類型包括12例結(jié)直腸癌、9例卵巢癌、6例胰腺癌、6例NSCLC。入組的患者均接受過多線治療，中位治療線數(shù)為3（范圍：1-11）。24例（39.3%）患者最近接受系統(tǒng)抗腫瘤治療最佳緩解為疾病進展（PD）；23例（37.7%）患者既往接受過一種PD-(L)1抑制劑，其中8例（34.8%）患者最近接受PD-(L)1抑制劑最佳緩解為PD。

圖6.? GEN1046在晚期實體瘤患者中的抗腫瘤療效

初期的臨床治療效果和安全性，還是非常不錯的，期待更大樣本量的研究數(shù)據(jù)積累。

除了BioNTech公司的GEN1046（PD-L1×4-1BB）雙抗外，Aptevo公司的ALG.APV-527是一種抗4-1BB x抗5T4雙特異性抗體藥物，用于治療多種5T4陽性實體瘤。在臨床前研究中，已顯示ALG.APV-527在存在表達5T4抗原的腫瘤細胞的情況下促進有效的和選擇性的免疫激活，耐受良好，肝酶水平、細胞因子水平或免疫細胞群沒有發(fā)生重大變化，也是潛在的重磅在研產(chǎn)品。

國內(nèi)布局的企業(yè)也較多，都處于臨床早期階段，匯總?cè)缦拢?/p>

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圖7.?國內(nèi)部分臨床階段4-1BB在研產(chǎn)品

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總結(jié)

4-1BB是一個很有前景的治療靶點，雖然目前尚未有商業(yè)化產(chǎn)品上市，但其臨床價值已經(jīng)過初步驗證。新型雙特異性抗體不僅選擇性高，也較好的規(guī)避了肝毒性。是PD-1/L1免疫治療的理想補充，且以4-1BB為靶點的CAR-T產(chǎn)品也有企業(yè)在研發(fā)和布局，期待未來有更振奮人心的數(shù)據(jù)。?參考文獻：[1] Cariad Chester, Miguel F. Sanmamed, Jun Wang, andIgnacio Melero, Immunotherapy targeting 4-1BB: mechanistic rationale, clinicalresults, and future strategies. Blood. 2018; 131:49-57[2] Muik A, Garralda E, Altintas I, et al. PreclinicalCharacterization andPhase I Trial Results of a Bispecific Antibody TargetingPD-L1 and 4-1BB(GEN1046) in Patients With Advanced Refractory Solid Tumors.CancerDiscov. 2022;candisc.1345.2021. doi:10.1158/2159-8290.CD-21-1345