慢性難愈合創(chuàng)面是指因多種外界或內(nèi)在因素引起經(jīng)治療1個(gè)月以上愈合進(jìn)展緩慢或仍未愈合的創(chuàng)面，主要包括創(chuàng)傷性潰瘍、糖尿病潰瘍、壓瘡、動(dòng)靜脈潰瘍、癌性潰瘍及感染性潰瘍等。該疾病由于多種復(fù)雜的內(nèi)外因素綜合作用，致使創(chuàng)面存在持續(xù)的感染及慢性炎癥而遷延難愈，所以在實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物模型應(yīng)體現(xiàn)這一特點(diǎn)。

動(dòng)物的選擇

兔、狗、豬、鼠是較常用的模型動(dòng)物。通常選用SD大鼠或 Wistar大鼠制作潰瘍創(chuàng)面模型。中國地鼠經(jīng)培育癥狀體征及體內(nèi)生化水平都類似于II型糖尿病，可作為糖尿病瘡瘍動(dòng)物模型的最佳選擇。在性別方面，因雌性大鼠的生理周期特性及妊娠可能使實(shí)驗(yàn)受到干擾，一般選擇雄性大鼠或雌雄各半。

造模方法
一創(chuàng)傷性潰瘍模型

常用皮膚切除+激素法。

造模方法

大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，麻醉后，在正中偏上的背部做一個(gè)直徑2cm(可選擇硬幣或瓶蓋) 標(biāo)識(shí)，常規(guī)備皮并無菌消毒，切開標(biāo)記處的全層皮膚至筋膜層，最后肌內(nèi)注射一定量的醋酸氫化可的松。

優(yōu)缺點(diǎn)

因其較易操作，所以實(shí)驗(yàn)常用此方法，但缺乏一個(gè)可靠的成功檢測標(biāo)準(zhǔn)。感染是慢性創(chuàng)面的普遍特征，慢性創(chuàng)面中病原菌檢測陽性率達(dá)81.03%，主要為大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌，然而在實(shí)驗(yàn)中普遍未應(yīng)用病原菌的檢測標(biāo)準(zhǔn)，因而很難推測模型創(chuàng)面是否與臨床上難愈合創(chuàng)面一致。

二
糖尿病潰瘍模型

采用鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)致糖尿病模型+全層皮膚缺損法。先用鏈脲佐菌素(STZ)對(duì)胰島素造成不同程度的破壞，使胰島素分泌相對(duì)不足或絕對(duì)不足而建立糖尿病模型。

造模方法

SPF級(jí)Wistar大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)1周后，禁食12h，腹腔注射STZ(60mg/kg)，3d后每天測定大鼠的血糖，采用尾部靜脈血測定，7d后若大鼠的非空腹血糖大于16.7mmol/L即可認(rèn)為糖尿病模型制作成功；再制作創(chuàng)面：大鼠麻醉后，在正中偏上的背部兩側(cè)各做一個(gè)直徑2cm的圓形標(biāo)記，備皮及消毒，手術(shù)剪切開皮膚深達(dá)筋膜層，造成皮膚缺損創(chuàng)面；最后在造模區(qū)接種金黃色葡萄球菌。一般菌的數(shù)量是106/g組織。

注意事項(xiàng)

1、在此造模的過程中應(yīng)該注意創(chuàng)面最好選擇背部，面積約為2cm×2cm大小，以免過大超過大鼠耐受范圍；血糖至少 16.7mmol/L以上，過低不符合糖尿病體征，過高易致大鼠死亡。

2、STZ具有對(duì)組織毒性小、動(dòng)物存活率高等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于構(gòu)建糖尿病模型。

3、此模型能體現(xiàn)出臨床糖尿病難愈合創(chuàng)面體征，但具體流程繁瑣，操作較難，且整體造模成本高。

三壓瘡模型

壓瘡即褥瘡，常發(fā)生于老年、癱瘓致使長期臥床的患者中，骨隆突是疾病多發(fā)部位。其中缺血-再灌注壓瘡造模方法最符合臨床發(fā)病機(jī)制及疾病特征。

造模方法

大鼠麻醉后，于后肢背側(cè)備皮，將大鼠置于木板，呈仰臥位固定四肢，使壓強(qiáng)為30kPa的磁鐵或壓力裝置施壓于雙側(cè)后肢膝關(guān)節(jié)小腿骨隆突處局部皮膚。該模型制作采用缺血-再灌注損傷原理，每個(gè)循環(huán)中，包括2h的缺血期和30min的再灌注期，3個(gè)循環(huán)/d，連續(xù) 2d。當(dāng)受壓部位出現(xiàn)紅、腫、熱等炎癥反應(yīng)，繼發(fā)有紅斑、水泡、潰瘍時(shí)可認(rèn)為造模成功。

優(yōu)點(diǎn)

此方法符合臨床壓瘡發(fā)生實(shí)際情況，可操作性強(qiáng)，成本不高。

用途

此模型用于動(dòng)物壓瘡實(shí)驗(yàn)參考。

四

感染性潰瘍

感染是造成創(chuàng)面遷延難愈的重要因素，常用皮損法+涂菌法。

造模方法

大鼠麻醉后，在大鼠的背部脊椎兩側(cè)各做一個(gè)直徑2cm的圓形標(biāo)記，切開全層皮膚并深達(dá)筋膜層，創(chuàng)面充分止血后種植一定濃度的大腸桿菌或金黃色葡萄球菌，3d后創(chuàng)面附有膿性分泌物，滲液較多，皮緣紅腫，皮溫升高，即可認(rèn)為造模成功。

優(yōu)點(diǎn)

制作方法簡單，成本低，成功率較高。

用途

應(yīng)用于感染性創(chuàng)面的實(shí)驗(yàn)研究。

糞便中優(yōu)勢菌包括螺桿菌、真細(xì)菌、擬桿菌等18個(gè)菌屬，MDL近期開展大鼠糞便致感染性潰瘍模型的構(gòu)建，詳見下方視頻

，時(shí)長00:50

結(jié)論

慢性創(chuàng)面基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究中，因不同慢性疾病導(dǎo)致的創(chuàng)面不同，造模方法各異，標(biāo)準(zhǔn)難統(tǒng)一。由于人與動(dòng)物的皮膚結(jié)構(gòu)和生理特性存在顯著差異，難以復(fù)制出完全與人類創(chuàng)面一致的動(dòng)物模型，需要研究者們繼續(xù)摸索。