安諾倫代理Abbexa——人SH2B銜接蛋白1(SH2B1)ELISA試劑盒
Abbexa 是一家專門為生命科學(xué)、藥物開發(fā)和生物技術(shù)領(lǐng)域提供生物工具的全球供應(yīng)商。Abbexa 為科學(xué)界提供一抗、二抗、蛋白質(zhì)、ELISA 試劑盒和酶以及其他專為研究而設(shè)計(jì)的試劑盒和工具,產(chǎn)品涵蓋單克隆抗體、多克隆抗體、純化蛋白質(zhì)及生物試劑。
品牌優(yōu)勢:
1.產(chǎn)品量多時(shí)廠家提供的折扣力度大;
2.直郵產(chǎn)品,貨期短;
3.廠家擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),他們隨時(shí)可以幫助解決任何疑問,并熱衷于提供答案和解決方案,24小時(shí)內(nèi)回應(yīng)問題,響應(yīng)快,解決度百分百,可提供退/換貨服務(wù)
具體案例分析:
試劑盒名稱:Human SH2B Adaptor Protein 1 (SH2B1) ELISA Kit
貨號(hào):abx383165??
規(guī)格:96tests
存儲(chǔ)溫度:按試劑盒說明,標(biāo)準(zhǔn)品、96孔板及A、B液置于-20℃,其余產(chǎn)品置于2-8℃冰箱
此產(chǎn)品用于科學(xué)研究,研究目的:檢測不同體重狀態(tài)人群SH2B1水平,驗(yàn)證肥胖相關(guān)基因多態(tài)性與蛋白表達(dá)差異
實(shí)驗(yàn)流程:
一、標(biāo)準(zhǔn)品制備
1、離心標(biāo)準(zhǔn)品
2、取1000ul標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液加入標(biāo)準(zhǔn)品中,充分混勻,靜置10分鐘,此為標(biāo)準(zhǔn)管1
3、在標(biāo)準(zhǔn)管2、3、4、5、6、7中加入標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液500ul
4、從標(biāo)準(zhǔn)管1中取出500ul加入標(biāo)準(zhǔn)管2,充分混勻,從標(biāo)準(zhǔn)管2中取出500ul加入標(biāo)準(zhǔn)管3,依次進(jìn)行梯度稀釋
5、標(biāo)準(zhǔn)管8為空白對(duì)照,加入標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液500ul
二、預(yù)實(shí)驗(yàn)樣品制備
1、準(zhǔn)備標(biāo)本1、標(biāo)本2
2、將標(biāo)本1使用樣品稀釋緩沖液進(jìn)行稀釋10倍,20倍,50倍,標(biāo)記為樣品管1、2、3(樣品管1為50ul樣品+450ul樣品稀釋緩沖液,樣品管2為25ul樣品+475ul樣品稀釋緩沖液,樣品管3為10ul樣品+490ul樣品稀釋緩沖液)
3、將標(biāo)本2使用樣品稀釋緩沖液進(jìn)行稀釋10倍,20倍,50倍,標(biāo)記為樣品管4、5、6(樣品管4為50ul樣品+450ul樣品稀釋緩沖液,樣品管5為25ul樣品+475ul樣品稀釋緩沖液,樣品管6為10ul樣品+490ul樣品稀釋緩沖液)
三、預(yù)實(shí)驗(yàn)
1、取出2排孔板
2、在第1排孔板中加入100ul標(biāo)準(zhǔn)管1、2、3、4、5、6、7、8,在第2排孔板中加入100ul樣品管1、2、3、4、5、6,使用微孔板振蕩器進(jìn)行混勻
3、用平皿密封器覆蓋平皿,并在37℃孵育2小時(shí)
4、用稀釋劑A將檢測試劑A稀釋100倍,并充分混合
5、取下蓋子并丟棄液體,不洗板
6、將100 ul檢測試劑A工作溶液等分至每個(gè)孔中。用平皿密封器覆蓋平皿,并在37℃孵育1小時(shí)
7、取下蓋子并丟棄溶液。用1X清洗緩沖液清洗板3次
8、用稀釋劑B將檢測試劑B稀釋100倍,并充分混合
9、將100 ul檢測試劑B工作溶液等分至每個(gè)孔中,密封平板,并在37℃下孵育1小時(shí)
10、取下蓋子,丟棄溶液,清洗板5次
11、將90 ul TMB底物加入每個(gè)孔中,用板密封劑覆蓋板,使用微孔板振蕩器進(jìn)行混勻,在37°C下遮光培養(yǎng)20分鐘
12、每個(gè)孔加入50ul終止液
13、立即測量450nm處的吸光度
問:稀釋了10倍、20倍、50倍,結(jié)果吸光度值都超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,什么原因?qū)е拢?/p>
答:大概率是稀釋倍數(shù)不夠?qū)е隆?/p>
廠家給的答復(fù):從我們對(duì)人類血清樣本的測試來看,稀釋率在0-1:128的范圍內(nèi)似乎適合這個(gè)試劑盒。根據(jù)這個(gè)范圍稀釋后結(jié)果仍不在標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)
咱們技術(shù)給的答復(fù):國內(nèi)外的標(biāo)本存在差異,建議稀釋500-1000倍再實(shí)驗(yàn)看看結(jié)果
最終客戶稀釋1000倍在標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi),保證了實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。